Abstract
sfondo
Per determinare l'effetto antibatterico della terapia fotodinamica in Enterococcus faecalis (E. faecalis)
biofilm in canali radicolari umani infettati sperimentalmente nelle infezioni primarie e ritrattamenti endodontici.
Metodi
centosessanta denti monoradicolati estratti con un canale radicolare è stato redatto utilizzando strumenti ProTaper. Settanta campioni sono stati lasciati senza riempimento del canale radicolare e sterilizzati in autoclave. I canali radicolari di altri 70 esemplari sono stati riempiti con Thermafil e AH Plus e le otturazioni canalari sono stati rimossi dopo 24 ore utilizzando i file ProTaper D e plasma sterilizzati. I campioni sono stati infettati con un isolato clinico di E. faecalis
per 72 ore. Sono stati prelevati campioni utilizzando punte di carta sterili per determinare la presenza di E. faecalis
nei canali radicolari. I campioni sono stati divisi casualmente in gruppi in base al loro trattamento con 20 denti ciascuna e un controllo. Nel gruppo PDT i denti sono stati trattati con PDT, consistente in blu toluidina fotosensibilizzatore e la sorgente luminosa PDT a 635 nm. Nel gruppo NaOCl (ipoclorito di sodio) i canali radicolari sono stati risciacquati con 10 ml di 3% NaOCl. Nel gruppo NaOCl-PDT canali radicolari sono state risciacquate con 10 mL di 3% di ipoclorito di sodio e poi trattati con PDT. I campioni sono stati prelevati dopo il trattamento con punte di carta sterili. Inoltre, rimanendo materiale di riempimento del canale radicolare è stato recuperato dalle pareti canalari. frazioni di sopravvivenza dei campioni sono state calcolate contando unità formanti colonie. Una analisi della varianza ad una via (ANOVA) è stato applicato ai dati per valutare l'effetto delle diverse tecniche di trattamento.
Risultati
trattamento antimicrobico dei canali radicolari hanno causato una significativa riduzione di carica batterica in tutti i gruppi. NaOCl irrigazione eliminato E. faecalis
più efficace. PDT da solo era meno efficace rispetto a irrigazione NaOCl e la combinazione di irrigazione NaOCl e PDT. livelli di CFU recuperati dal materiale di riempimento dopo NaOCl irrigazione dei canali radicolari sono stati 10fold superiore rispetto a PDT e la combinazione di irrigazione NaOCl e PDT.
Conclusioni
terapia fotodinamica uccisi E. faecalis
nelle infezioni endodontiche primarie sperimentali e si ritirò canali radicolari umani. PDT è un integratore efficace nel canale radicolare disinfezione, soprattutto in ritrattamenti endodontici.
Parole
terapia fotodinamica PDT fotoattivati chemioterapia fototerapia laser canale radicolare disinfezione infezione Endodonzia Enterococcus faecalis elettronico materiale supplementare
La versione online di questo articolo (doi :. 10 1186 /1472-6831-14-132) contiene materiale supplementare, che è disponibile per gli utenti autorizzati
Sfondo
un trattamento canalare è la combinazione di strumentazione meccanica di un sistema canalare, la sua. sbrigliamento chimica e riempimento con materiale inerte, progettato per mantenere o ristabilire la salute dei tessuti periradicolari. Sebbene, microrganismi infettanti vengono rimossi durante debridement meccanica combinata con irrigazione chimica, batteri residui sono facilmente rilevabili in circa il 50% al momento del riempimento del canale radicolare, malgrado l'ampia irrigazione con ipoclorito di sodio [1]. I batteri sono stati trovati in istmi, canali laterali, pinne, ramificazioni e strutture anatomiche, che rimangono inaccessibili per la strumentazione meccanica [2, 3].
Batteri e tossine batteriche che rimangono nel sistema dei canali radicolari dopo la preparazione chemio-meccanico o di entrare nel sistema dei canali radicolari riempiti via salivare microinfiltrazioni, perdita del restauro coronale o otturazione del canale radicolare insufficiente può portare al fallimento [4-7]. malattia post-trattamento associato con scarsa trattamento endodontico può essere causato a causa di non usare diga di gomma, scarso accesso con conseguente mancate canali radicolari non trattati, strumentazione inadeguata, disinfezione inadeguata, otturazione canalare insufficiente o errori iatrogeni, ad esempio strumento fratturato, perforazione, sporgenza [8]
. ritrattamento canalare è considerato più difficile rispetto al trattamento canalare primario in quanto vi sono ostacoli di solito intracanalari da superare, ad esempio rimozione guttaperca, materiali intracanalari quali i punti d'argento, i messaggi o strumenti fratturati, la correzione degli errori iatrogene quali sporgenze o perforazioni [8]. Studi precedenti hanno dimostrato che il materiale di riempimento del canale radicolare non può essere rimosso completamente lasciando guttaperca e /o sigillante sulla parete del canale radicolare rendendo la disinfezione del sistema dei canali radicolari più difficile rispetto ai trattamenti canalari primarie [9-11].
Dopo la rimozione del canale radicolare e altri ostacoli intracanalari contaminazione batterica residua deve essere ridotto al minimo per il trattamento endodontico successo [12]. Un metodo preferito è alternata irrigazione con ipoclorito di sodio e un agente chelante, per esempio L'acido citrico o l'acido etilendiamminotetraacetico [13]. composti clorexidina e iodio sono stati anche sostenuto come irriganti supplementari per canale radicolare (ri) trattamento [14].
fallimenti endodontici sono associati con alte percentuali di microrganismi aerobi e facoltativi gram-positivi [15]. Enterococcus feacalis
, che può essere trovato in canali radicolari trattati e non trattati, è altamente associato con fallimenti [16]. Pseudomonas
, stafilococchi e streptococchi
sono anche causativa per i guasti.
La terapia fotodinamica (PDT), noto anche come terapia photoradiation, fototerapia, fotochemioterapia, o la chemioterapia fotoattivato (PACT) è un trattamento medico, che utilizza l'attivazione di un agente fotosensibilizzante (fotosensibilizzatore) mediante esposizione a luce di una specifica lunghezza d'onda, in presenza di ossigeno [17]. Vi è un trasferimento di energia dal fotosensibilizzatore attivato per ossigeno disponibile che risulta nella formazione di specie di ossigeno tossiche, come ossigeno singoletto e radicali liberi. ossigeno singoletto e specie radicaliche causano una distruzione rapida e selettiva di microrganismi. La maggior parte dei fotosensibilizzatori sono attivati da luce tra 630 e 700 nm. I principali fotosensibilizzanti in letteratura sono ematoporfirinico derivati (620-650 nm), fenotiazina, come toluidina blu e blu di metilene (620-700 nm), cianina (600-805 nm), agenti fitoterapici (550-700 nm) e hytalocyanines (660-700 nm) [18-20].
PDT ha dimostrato di essere una terapia aggiuntiva al trattamento endodontico convenzionale per ottimizzare la riduzione microbica nei canali radicolari nelle infezioni endodontiche primarie [21-23]. Garcez et al. [24] studiato l'effetto della PDT in ritrattamenti endodontici in vivo. Essi hanno scoperto che PDT come coadiuvante per il trattamento endodontico convenzionale porta ad una riduzione significativa della carica batterica dopo l'irrigazione con ipoclorito di sodio, perossido di idrogeno e EDTA ed è efficace contro i batteri multiresistenti. In ritrattamenti è impossibile rimuovere il canale radicolare riempire completamente, impedendo disinfezione del sistema canalare. Sulla base dei risultati precedenti, PDT si suppone di avere un effetto antimicrobico aggiuntivo dopo l'irrigazione canalare, in particolare su microrganismi resistenti.
Lo scopo del presente studio è quello di indagare l'effetto antibatterico della terapia fotodinamica (PDT) in Enterococcus faecalis
biofilm in canali radicolari umani infettati sperimentalmente di infezioni endodontiche primarie e secondarie.
Metodi
esemplari Tooth
Per questo studio, abbiamo selezionato centosessanta intatte estratti denti anteriori umani permanenti e premolari. Due radiografie sono state prese di ogni campione, un vestibolo-linguale /palatale e un'immagine mesiale-distale, al fine di garantire che gli esemplari avevano normali camere di polpa, canali radicolari dei brevetti e apici completamente formate, senza alcun segno di riassorbimento. Sono stati esclusi denti con otturazioni canalari.
I denti sono stati estratti presso il Centro di medicina dentale, Dipartimento di Chirurgia maxillo-facciale, University Medical Center di Friburgo, a causa del mal di denti acuti, complicazioni infiammatorie gravi da malattie sistemiche, nel contesto della ortodontico trattamento, infezioni acute (ascesso), cattive condizioni di salute generale o, nel caso dei denti del giudizio, prima di complicanze da trattamento ortodontico. I pazienti hanno dato il loro consenso informato scritto per l'utilizzo dei denti estratti per la ricerca, che è stato esaminato e approvato dal Comitato Etico dell'Università di Friburgo (175/13).
Cavità di accesso standard sono state preparate e la precisa lunghezza del dente è stata determinata l'inserimento di un 10 K-file ISO (VDW®, Monaco di Baviera, Germania) nel canale fino a quando il file è stato visibile il forame apicale. La punta del file è stata quindi posta esattamente al forame apicale del dente per misurare la lunghezza del dente. Lunghezza di lavoro (WL) è stato fissato a 1 mm a corto di lunghezza dei denti. canali radicolari sono stati preparati con strumenti ProTaper (Dentsply®, Konstanz, Germania) secondo le istruzioni del produttore, in combinazione con un Endo IT Professional (VDW®, Monaco di Baviera, Germania) a 250 giri al minuto. Durante la preparazione canalare una soluzione di ipoclorito di sodio al 3% è stato utilizzato per l'irrigazione [25]. preparazione canalare è stata effettuata utilizzando i file di plasmare ProTaper S1 e S2 e finitura file F1 e F2. preparazione apicale è stata eseguita terminato con il file F2 ProTaper a WL. Un ProTaper F2 punto di guttaperca è stato fissato a WL e la regione apicale è stato coperto con composita utilizzando Optibond FL (Kerr Corporation, Orange, CA, USA) e CeramX mono (Dentsply®, Costanza, Germania) per un sigillo apicale. I denti sono stati incorporati in metacrilato (Techovit 4070 ™, Haereus Kulzer®, Wernheim, Germania) e poi decoronated utilizzando uno strumento di taglio rotativo diamante (6830 L.314.014, Gebr Brasseler GmbH & amp;. Co. KG, Lemgo, Germania) a 40.000 giri al minuto a livello della giunzione cemento-smalto. Dopo irrigazione finale con ipoclorito di sodio al 3% e il 5% di sodio tiosolfato, i denti sono stati successivamente trattati in autoclave a 134 ° C per 18 minuti. Per verificare che i canali radicolari erano liberi di microrganismi, i campioni sono stati prelevati dai canali radicolari con sterili punti di carta ProTaper F2. punti di carta incubate nel canale radicolare per un minuto e poi trasferiti in una fiala contenente 750 ml di soluzione sterile di Ringer, in agitazione per 30 secondi e 100 microlitri sono stati coltivati su una piastra di agar sangue per 24 ore. Denti con una cultura positiva sono stati esclusi.
Canalare e ritrattamento
I canali radicolari di 70 campioni sono stati riempiti con una dimensione di 25 Thermafil otturatore (Dentsply®, Costanza, Germania) in combinazione con un sigillante a base di resine epossidiche (AH Inoltre, Dentsply®, Costanza, Germania). Per la decontaminazione degli otturatori Thermafil sono state incubate in un flaconcino con una soluzione di ipoclorito di sodio al 3% per 10 minuti [26]. Il sigillante è stato inserito nel terzo coronale del canale radicolare con una sterile punta di carta ProTaper F2. Ogni otturatore è stato riscaldato con un ThermaPrep Inoltre Forno (Dentsply®, Costanza, Germania) fino a quando un segnale acustico indica che l'otturatore era pronto per il posizionamento. È stato quindi inserito nel canale radicolare preparato con un movimento lento, costante e continua in direzione apicale. La maniglia di ciascun otturatore è stato stabilizzato durante il raffreddamento. Il vettore non è stato tagliato per essere in grado di rimuovere facilmente. 2 radiografie sono state prese da ogni campione, un vestibolo-linguale /palatale ed una immagine mesiale-distale, per garantire la completa riempimento del canale radicolare.
Dopo 24 ore i vettori sono stati rimossi e il riempimento del canale radicolare è stato rimosso usando ProTaper D1 e strumenti D2 fino a lunghezza di lavoro è stato raggiunto utilizzando 5 × ingrandimento. Dopo la rimozione del canale radicolare riempimento 2 radiografie sono state prese da ciascun campione di visualizzare il materiale di riempimento canalare rimanente.
Dopo aver rimosso il canale radicolare riempiendo i campioni sono stati sezionati longitudinalmente con un diamante taglio rotativo sega sotto acqua nebulizzata. I campioni sono stati sterilizzati con la sterilizzazione al plasma (H
2O 2). Dopo la sterilizzazione le due sezioni dei campioni sono stati attaccati gli uni agli altri con un adesivo (Heliobond, Ivoclar Vivadent, Ellwangen, in Germania).
Enterococcus faecalis
infezione
canali radicolari sono stati infettati con un isolato clinico di E. faecalis. E. faecalis
è stato coltivato durante la notte in Tryptic Soy Broth (TSB) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) a 36 ° C da 5 a 10% di CO 2 e siringato nel canale radicolare preparato utilizzando un ago di irrigazione 30 gauge. canali radicolari sono stati infettati con E. faecalis
per 72 ore per permettere la formazione di biofilm. TSB è stato cambiato ogni 24 ore. Dopo 72 ore i canali radicolari sono stati risciacquati con 5 ml di soluzione sterile di Ringer e un campionato con 3 punti sterili carta ProTaper F2 (Dentsply®, Konstanz, Germania) per valutare la presenza di E. faecalis
nei canali radicolari. Le punte di carta sono stati trasferiti in 750 ml di soluzione sterile di Ringer. I campioni sono stati coltivati su agar sangue per determinare la presenza di E. faecalis
nei canali radicolari. 10 esemplari che non erano radice riempito e 10 campioni con canali radicolari ritirati sono stati lasciati senza infezione da E. faecalis
e serviti come gruppo di controllo.
Dopo 72 ore sono stati prelevati campioni utilizzando i punti di carta e coltivate su agar sangue a verificare, che canali radicolari non infette erano esenti da microrganismi.
trattamento antimicrobico di infezioni primarie
Settanta campioni con infezioni primarie sono stati divisi casualmente in tre gruppi. Nel primo gruppo (gruppo PDT), i canali radicolari dei 20 campioni sono stati trattati con PDT (PACT200, Cumdente, Tübingen, Germania), che consiste in una sorgente di luce a 635 nm in combinazione con il fotosensibilizzatore PACT-Fluid Endo, un toluidina soluzione blu a 13-15 mg /mL. PACT-Fluid Endo è stato portato nel canale radicolare con un ago da 30 gauge. Dopo 60 secondi di incubazione del PACT-Fluid Endo è stato attivato utilizzando la sorgente luminosa PACT con la punta guida PACT Luce Endo, una 100 mW sorgente luminosa a LED a 635 nm. La punta guida PACT luce Endo è stato impostato come vicino a WL possibile e attiva per 120 secondi in base alle istruzioni del produttore. canali radicolari sono stati risciacquati con 5 ml di soluzione di Ringer per rimuovere la soluzione Endo PACT-Fluid, e campionati con 3 punti di carta ProTaper F2 sterile. punte di carta sono stati trasferiti in 750 ml di soluzione sterile di Ringer, in agitazione per 30 secondi e 100 ml sono stati coltivati su una piastra di agar sangue e le unità formanti colonie sono state contate.
Nel secondo gruppo (gruppo di NaOCl), 20 canali radicolari sono stati irrigati 10 ml di 3% NaOCl con una portata di 3-3,5 ml al minuto. NaOCl è stata rimossa risciacquando i canali radicolari con 2,5 ml di soluzione sterile di Ringer.
Nel terzo gruppo, 20 canali radicolari sono stati trattati con ipoclorito di sodio e (gruppo NaOCl-PDT) PDT. I canali radicolari sono stati risciacquati con 10 mL di ipoclorito di sodio al 3% con un ago da 30 gauge irrigazione con una portata di 3-3,5 ml per minuto. ipoclorito di sodio in eccesso è stato rimosso da irrigazione con 2,5 ml di soluzione sterile di Ringer ei canali radicolari sono stati trattati con PDT e campionati secondo il protocollo del gruppo PDT. In un gruppo di controllo, 10 canali radicolari sono stati risciacquati con 10 ml di soluzione di Ringer.
Trattamento antimicrobico di infezioni secondarie Compra di trattamento antimicrobico delle infezioni endodontiche secondarie, 70 campioni sono stati divisi casualmente in tre gruppi. Nel primo gruppo (gruppo PDT), 20 canali radicolari sono stati trattati con PDT (PACT, Cumdente, Tubinga, Germania) e prelevata secondo trattamento del gruppo PDT delle infezioni primarie.
Nel secondo gruppo (gruppo di NaOCl) , 20 canali radicolari sono stati irrigati con 10 mL di 3% NaOCl con una portata di 3-3,5 ml per minuto. NaOCl è stata rimossa risciacquando i canali radicolari con 2,5 ml di soluzione sterile di Ringer.
Nel terzo gruppo (gruppo NaOCl-PDT), 20 canali radicolari sono stati risciacquati con 10 ml di ipoclorito di sodio al 3% (NaOCl) con un calibro 30 ago irrigazione con una portata di 3-3,5 ml per minuto. NaOCl è stato rimosso mediante irrigazione con 2,5 mL di soluzione sterile di Ringer e un campione è stata presa utilizzando 3 punti di carta ProTaper F2 sterile. Successivamente canali radicolari sono stati trattati con PDT e campionati come descritto sopra.
Nel gruppo di controllo, 10 canali radicolari sono stati risciacquati con 10 ml di soluzione di Ringer.
Dopo campioni antimicrobiche sono state prese da tutti i campioni con 3 sterile ProTaper F2 punte di carta e trasferiti in un flacone contenente 750 ml di soluzione sterile di Ringer a determinare le frazioni di sopravvivenza.
campioni sono stati nuovamente separati usando un bisturi sterile e il canale radicolare restante riempimento sulle pareti canalari sono stati raccolti utilizzando un handfile sterile (VDW ®, Monaco di Baviera, Germania) in un flacone contenente 5 ml di TSB e pernottamento colta. 100 ml di campioni sono quindi stati coltivati su agar sangue. Sopravvivenza frazioni dei campioni sono stati calcolati contando unità formanti colonie. Microscopio elettronico a scansione
(SEM)
Per SEM esemplari esame dei denti, sono stati preparati i campioni di Thermafil guttaperca e AH plus. I campioni di appena miscelato AH Inoltre sono stati fissati per 24 ore. campioni AH Plus e campioni Thermafil sono stati disinfettati con il 70% di etanolo. I campioni sono stati tagliati dente verticalmente in due pezzi con una sega diamantata rotante di taglio. sezioni di campioni di denti sono stati sterilizzati in autoclave a 134 ° C per 18 minuti. Le sezioni dente di campioni e campioni di materiale sono stati infettati con E. faecalis
in TSB per 72 ore a lamelle a camera (μ-Slide 8 bene, Ibidi GmbH, Martinsried, Germania). I campioni materiali e campioni denti sono stati divisi in tre gruppi. I pozzi di gruppo non hanno ottenuto alcun trattamento antimicrobico e servito come controllo. Nel gruppo due campioni e campioni di materiale sono stati trattati con PACT-Fluid Endo per 1 minuto e la sorgente di luce PACT per 1 minuto. Nel gruppo di tre campioni e campioni di materiale sono state incubate con 3% NaOCl per 1 minuto. Dopo il trattamento antimicrobico, i pozzi sono stati lavati con 1 ml di soluzione sterile di Ringer. I campioni ei campioni sono stati fissati in 8% di formaldeide notte a 4 ° C e disidratate in alcool graduata (30%, 50%, 70%, 80%, 90% una volta e due volte nel 99,8% per 1 ora). Poi essiccamento punto critico (Critical Point Dryer CPD 030; Bal-Tec, Wallruf, Germania) con anidride carbonica liquida è stata effettuata secondo procedura standard. I campioni sono stati atomizzate con l'oro in una torre di verniciatura 050 SCD (Bal-Tec) ed esaminati utilizzando un Zeiss Leo 435 VP microscopio elettronico a scansione (Leo Electron Microscopy Ltd Cooperazione Zeiss Leica, Cambridge, Inghilterra) a 10-12 kV.
analisi statistica
Un analisi della varianza ad una via (ANOVA) è stata applicata ai dati per valutare l'effetto di differenti tecniche di trattamento sulla riduzione del E. faecalis
in canali radicolari. Il livello di significatività è stato fissato a p & lt; 0.05
. Tutti i test statistici sono stati condotti utilizzando SSPS (15,0)
. Risultati
effetto dei trattamenti antimicrobici nelle infezioni primarie
La Figura 1 mostra di 72 ore E. faecalis
biofilm. Media E. faecalis
conta prima di trattamenti antimicrobici erano 2,32x10 6 CFU /ml. Figura 1 microscopio elettronico di scansione di radice canale dentina ed i materiali di riempimento radice Thermafil guttaperca e AH Inoltre colonizzato con E.faecalis con ingrandimento di 5000 ×. Trattamenti a base di ipoclorito di sodio al 3% o PDT gravemente riducono E. faecalis
su dentina e le superfici dei materiali di riempimento del canale radicolare. Ci sono stati trovati alcuni normali cellule batteriche di forma su guttaperca e AH più dopo i trattamenti. Rimanendo cellule su dentina dopo i trattamenti hanno mostrato forma anomala.
Trattamento dei canali radicolari con PDT da sola ha causato una riduzione della carica batterica, causando un kill 92,7% di E. faecalis
. Risciacquo canali radicolari con ipoclorito di 3% di sodio (NaOCl) ottenuta una riduzione del 99,9% e la combinazione di NaOCl disinfezione e PDT ridotti vitalità batterica del 99,9%. Irrigazione con ipoclorito di sodio al 3% e la combinazione dell'irrigazione NaOCl e PDT portato ad una significativamente maggiore riduzione E. faecalis
rispetto al solo trattamento PDT (p & lt; 0,0001). Dopo casi irrigazione con 3% NaOCl, 80% dei canali radicolari erano coltura canali negativi. Il trattamento aggiuntivo con PDT aumentato il numero di canali di cultura negativi al 90%. Quando canali radicolari sono stati trattati con sola PDT, 1 su 20 casi (5%) è stata la cultura negativo (Tabella 1) .table 1 Riduzione di E. faecalis dopo il trattamento antimicrobico
contaminazione con E. faecalis
CFU /ml × 106
trattamento
contaminazione dopo il trattamento CFU /ml × 106
Riduzione E. faecalis
[%]
Cultura campioni negativi [%]
media
Std
3% NaOCl
PDT
medio
Std
primaria infection
2.48
2.04
X
-
0.0006
0.0003
99.9a
80
2.22
1.92
-
X
0.16
0.14
92.7b
5
2.13
1.86
X
X
0.0004
0.0003
99.9a
90
Secondary infection
2.24
1.76
X
-
0.0005
0.0001
99.9a
55
2.57
2.21
-
X
0.02
0.04
99.9a
0
2.26
1.58
X
X
0.001
0.001
99.9a
30
Percentuale di campioni negativi della cultura. lettere in apice indicano differenze statistiche.
effetto dei trattamenti antimicrobici nelle infezioni secondarie
trattamento antimicrobico dei canali radicolari ritirati causato una significativa riduzione di carica batterica in tutti e tre i gruppi, con un conseguente uccidere il 99,9% di E. faecalis
(Tabella 1). NaOCl irrigazione realizzato canali radicolari coltura-negativo nel 55% dei casi, mentre in denti trattati con PDT senza campione fosse coltura negativa. Per la combinazione di irrigazione NaOCl e PDT il 30% dei casi sono stati trovati cultura-negativi.
E. faecalis
isolati dal materiale di riempimento canalare
La figura 1 mostra 72 ore E. facealis
biofilm su Thermafil guttaperca e AH plus. In tutti i gruppi E. facealis
potrebbe essere colta dal materiale di riempimento isolata recuperato dalle pareti canalari. C'erano la stessa quantità di CFU recuperati dal riempimento radice campioni di materiale con PDT e la combinazione di irrigazione NaOCl seguito da PDT. livelli di CFU recuperati dal materiale di riempimento dopo NaOCl irrigazione dei canali radicolari sono stati circa 10fold superiore rispetto a PDT e la combinazione di irrigazione NaOCl e PDT.
Discussione
Nel presente studio, PDT provoca una riduzione della vitalità batterica in sia primaria dell'infezione endodontica e canali radicolari ritirati infettati con E. faecalis
. Trattare canali radicolari con ipoclorito di sodio (NaOCl), PDT o una combinazione di irrigazione NaOCl e PDT causato una riduzione significativa di E. faecalis
nei canali radicolari. Nei casi di infezioni primarie, la combinazione di irrigazione NaOCl e irrigazione PDT NaOCl raggiunto il numero massimo di canali radicolari coltura-negativo (90%), NaOCl irrigazione soli canali radicolari coltura-negativo raggiunti nel 80%, mentre dopo il trattamento utilizzando solo PDT un campione era cultura-negativo. Per le infezioni secondarie, NaOCl irrigazione raggiunto il maggior numero di canali radicolari cultura-negativo, mentre dopo il trattamento con PDT tutti gli esemplari sono stati cultura-positivi. Garcez et al. [24] studiato l'effetto della PDT in ritrattamenti endodontici in vivo. Essi hanno scoperto che la PDT come coadiuvante per il trattamento endodontico convenzionale porta ad una significativa ulteriore riduzione della carica batterica dopo l'irrigazione con ipoclorito di sodio, perossido di idrogeno e EDTA ed è efficace contro i batteri resistenti a più farmaci. Sulla base di questi risultati, PDT si suppone di avere un effetto antimicrobico aggiuntivo dopo l'irrigazione canalare, in particolare su microrganismi resistenti. I risultati di questo studio non possono confermare questi risultati nei casi di ritrattamenti. I microrganismi potrebbero essere in grado di invadere la dentina e tubuli dentinali coperti da materiale di riempimento del canale radicolare e potrebbero non essere accessibili per gli agenti o componenti PDT disinfezione. Inoltre, irrigularities a forma di canali radicolari, pinne e tubuli dentinali potrebbero limitare la diffusione di NaOCl o fotosensibilizzatore, ossigeno e luce. Il materiale di riempimento del canale radicolare rimanente può ospitare microrganismi rendendo impossibile per soluzioni di irrigazione, il fotosensibilizzante e la luce di penetrare. La luce emessa potrebbe essere assorbita o riflessa dal canale radicolare residuo materiale di riempimento limita gli effetti della PDT. Tuttavia, nel presente studio canale radicolare isolato materiale di riempimento mostra contaminazione inferiore con E. faecalis
dopo il trattamento con PDT e la combinazione di irrigazione NaOCl e PDT rispetto ad irrigazione NaOCl. Il fotosensibilizzante potrebbe aver penetrato queste aree di materiale di riempimento aderente alla parete del canale radicolare meglio di ipoclorito di sodio o ipoclorito di sodio viene inattivato quando si entra in contatto con E.faecalis
o ai suoi componenti della struttura biofilm come [27].
Il resistenza dei microrganismi organizzati in biofilm è stato descritto in precedenza [28]. I batteri in strati profondi del biofilm sono più resistenti a causa della limitazione di diffusione (fotosensibilizzante, ossigeno o la luce o l'agente di irrigazione) attraverso la struttura organica [29]. Inoltre, composti organici, come le cellule morte o matrice extracellulare biofilm, neutralizzare agenti antimicrobici. Studi precedenti hanno suggerito di utilizzare PDT come trattamento adiuvante per l'irrigazione in radice canale di disinfezione [21-23, 30]. Gli autori hanno trovato protocolli irrigazione in base alle NaOCl, perossido di idrogeno e chelanti agenti, come EDTA, per essere superiore in trattamento antimicrobico endodontico, soprattutto in termini di biofilm disintegrazione. Tuttavia, Garcez et al. [30] ha dimostrato un ulteriore effetto di PDT dopo il trattamento convenzionale e trovato E. faecalis
essere 100-1000 volte più sensibile alla PDT uccisione mediata rispetto alle specie Gram-negativi [31]. L'effetto antimicrobico inferiore PDT rispetto irrigazione può essere spiegato con le cellule morte e residui cellulari che rimangono nel canale radicolare, sulla parete del canale radicolare o può ancora essere integrati nella struttura biofilm simile neutralizzare l'uccisione mediata PDT, in modo che il fotosensibilizzante, l'ossigeno e la luce non può raggiungere i batteri in strati profondi. Irrigazione rimuove le cellule morte e resti.
Nel presente studio, è stato utilizzato un modello di infezione monospecies con un isolato clinico di E. faecalis
. E. faecalis
è stata spesso trovato nelle infezioni primarie e secondarie, soprattutto dei sistemi canalari [32, 33]. E. faecalis
ha dimostrato di essere molto resistente agli agenti disinfettanti e antibiotici [32]. E. faecalis
può efficacemente essere colonizzati, forme biofilm sulle pareti del canale di radice e invade tubuli dentinali [34-36]. Questo modello monoinfezione è stato utilizzato per riprodurre la stessa struttura di biofilm come in ogni canale radicolare degli esemplari con una specie che è noto per essere difficile da eliminare da sbrigliamento chemio-meccanico [32]. Tuttavia, le infezioni canale radicolare sono spesso associate a più specie [27, 37]. Un biofilm con specie diverse possono differire nel contenuto dei microrganismi in ogni campione che potrebbero compromettere l'effetto di disinfezione [27].
Campioni provenienti dai canali radicolari sono state scattate con sterili punti di carta ProTaper F2. punti di carta hanno solo una parte di batteri dalla parete del canale radicolare. Questo metodo di campionamento sottovalutare i livelli di CFU nei canali radicolari prima e dopo il trattamento e non danno il totale E. faecalis
conteggi per ogni campione. Un campione di coltura-negativo non significa un canale radicolare sterile. Per tutti i campioni sono stati utilizzati ProTaper F2 punte di carta. Questi punti di carta hanno la stessa dimensione di superficie e perfettamente nel canale radicolare preparato per il campionamento e questo metodo è stato usato in studi precedenti [24, 29, 32]. tecniche molecolari, come le tecniche di PCR, sono spesso utilizzati per rilevare microrganismi in canali radicolari [37, 38]. Ma in questo studio, è stato importante distinguere tra batteri viventi (coltivabili) e morti (non coltivabili). Tecniche molecolari avrebbero portato a risultati falsi positivi quando i resti delle cellule e del DNA sono lasciati nel canale radicolare dopo il trattamento antimicrobico, sopravvalutando la contaminazione residua del canale radicolare. Questa sovrastima sarebbe stato superiore per i campioni trattati con PDT rispetto al irrigazione, perché l'irrigazione rimuoverà un sacco di cellule morte e residui cellulari. Pertanto, un secondo campione è stata presa dopo il trattamento antimicrobico con un K-file di sterili per rimuovere schegge dentina dalla parete del canale radicolare. In questo modo, il restante contaminazione della parete del canale radicolare e tubuli dentinali stata valutata. Questo limita la sottovalutazione della contaminazione batterica campionando utilizzando punti di carta.
Souza et al. [29] infettati canali radicolari prima plasmare. procedure di strumentazione e di irrigazione causano ulteriore stress sui microrganismi e perturbare il biofilm. È stato dimostrato che la strumentazione di canali radicolari riduce significativamente batteri nei canali radicolari [39, 40]. Nel presente studio, PDT è stato testato in canali radicolari completamente forma e nel caso di trattamento endodontico dopo il riempimento del canale radicolare e la rimozione del canale radicolare. Questo non imita la situazione clinica. Questi campioni sono stati poi infettati con un isolato clinico di E. faecalis
. Entro 72 ore di infezione, E. faecalis
era in grado di formare una struttura biofilm-like e l'effetto dei diversi trattamenti antimicrobici in E. faecalis
in canali radicolari potrebbero essere indagati.
Conclusione
PDT riduce E. faecalis
in infezioni primarie infette e si ritirò canali radicolari. Tuttavia, l'irrigazione con ipoclorito di sodio al 3% è più efficace per eliminare E. faecalis
rispetto alla PDT. PDT è stato in grado di eliminare E. faecalis
rimanga canalare materiale di riempimento sulla parete del canale radicolare in modo più efficace rispetto al 3% NaOCl. PDT non è un'alternativa, ma un complemento efficace nel canale radicolare disinfezione, soprattutto nei casi di ritrattamenti. Turbativa del biofilm prima PDT e l'uso aggiunto di una base di ipoclorito di sodio approccio convenzionale rimangono obbligatori.
Dichiarazioni
Riconoscimento
Gli autori ringraziano il Dr. Susanne Stampf e Kirstin Vach (Institute of Medical Biometria e Informatica Medica Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.
