ABSTRACTTitle:. L'efficacia di clorexidina Alcohol-Free nel ridurre i livelli di Streptococcus mutans
Scopo: confrontare le proprietà antimicrobiche di clorexidina Alcohol-Free con altri bocca-risciacqui antimicrobici
Metodi:. Streptococcus mutans (ceppo GS5), è stato coltivato su agar, e risospese in un terreno di coltura sterile triptone brodo di soia (TSB) integrato con estratto di lievito. Quattro esperimenti unici sono stati condotti ogni aggiungendo le inoculums della sospensione batterica alla prova agenti antimicrobici
Risultati:. Esperimento # 1: La crescita di S. mutans è stata completamente inibita a concentrazioni 5% e 1% di alcol-libero clorexidina (AFC) e clorexidina contenente alcol (CHX). La crescita batterica è avvenuto in tutte le altre diluizioni con il più notevole in 1% Biotene & reg; (OD max = 1.383 nm) seguita da 0,01% Biotene & reg; (OD max = 1.328). Il più grande tempo di raddoppio è stato 0,01% CHX a 2,1013 hr
Experiment # 2:. Tempo di generazione e OD max erano simili per tutte le diluizioni dei diversi reagenti
Experiment # 3:. 5 Minuti breve l'esposizione -term di non diluito CHX ha inibito la crescita di S. mutans. AFC inibito la crescita batterica per 6 ore. Il tempo massimo OD e raddoppiando erano, rispettivamente, 1.288 e 1,1213 hr. La OD massima e tempo di generazione per Biotene & reg; erano 0,891 e 1,5516 rispettivamente HR
Experiment # 4:. 5 minuti di esposizione a breve termine di CHX non diluito e AFC ha inibito la crescita di S. mutans. La crescita batterica è avvenuto in tutte le altre diluizioni con il più notevole in piena forza Biotene & reg; (OD max = 1.629) seguito da 1% di etanolo (OD max = 1.598). Il più grande tempo di raddoppio è stato del 5% di etanolo a 1.706 ore
Conclusioni:.. Clorexidina alcool-libera è efficace nel sopprimere la crescita batterica di S. mutans e, quindi, è una valida alternativa all'alcol contenenti clorexidina
soluzioni bocca risciacquo INTRODUCTIONAntimicrobial sono utilizzati in molte situazioni cliniche sia per scopi profilattici e terapeutici (1). Più in particolare, bocca-risciacqui sono diventati un importante procedura aggiuntiva per una buona igiene orale meccanica o nella prevenzione delle infezioni successive ai batteri provenienti da procedure chirurgiche intraorali o immunosoppressione dovuta alle radiazioni alla testa /neck.1,4,5
< p> clorexidina gluconato (CHX), un agente antibatterico ad ampio spettro, è uno degli agenti antisettici più utilizzati care.5 dentale completa efficace sia contro microrganismi Gram-positivi e Gram-negativi, funghi e alcuni virus, è stata dimostrato di inibire la formazione di placche, ridurre l'infiammazione gengivale e prevenire caries.3,5 dentale Inoltre, in uso orale, CHX è esente da tossicità sistemica, e resistenza microbica o alterazioni del microbiota orale non occur.8,11 Tuttavia, la prolungata uso di CHX è limitata a causa dello sviluppo di estrinseche dei denti e della lingua discromie, così come alterazioni nel gusto che porta alla diminuzione compliance.2,3,5,7,9,11 dunque pazienti, la maggior parte dei dentisti non raccomandare a lungo -term uso quotidiano di CHX come una bocca-rinse.11 gengivale desquamazione e la mucosa dolorosa sono stati segnalati anche in grave cases.1,5
letteratura corrente supporta l'uso quotidiano di 0,12% o 0,2% CHX come antisettico agenti. Tuttavia, un ulteriore fattore limitante è che abitualmente utilizzati clorexidina bocca-risciacqui contengono alcol, che può causare dolore, irritazione ed essere dannoso per i pazienti con mucosite, i pazienti sottoposti a radioterapia testa /collo, i bambini, i pazienti immunocompromessi o recupero di alcolisti. effetti potenzialmente negativi di alcol contenente CHX bocca risciacquo hanno portato alla formulazione di un nuovo 0,12% CHX alcol-free (AFC) in bocca rinse.1,2,11
Biotene & reg; è una bocca-risciacquo senza alcool che può migliorare molti dei sintomi della xerostomia indotta da radiazioni. Agisce producendo un sistema enzimatico antimicrobico nella cavità orale che penetra le pareti cellulari dei batteri formanti placca, distruggendole solo gengivale al gumline.12 Questo sistema enzimatico costituito da proteine innate salivari difesa umani; lisozima, lattoferrina e perossidasi. La lattoferrina è una glicoproteina ferro-legante che consente di visualizzare l'attività battericida contro una varietà di batteri in forma libera-ferro, apo-LF, e bacteriostasis attraverso ferro sequestration.6,10
Sia AFC e Biotene & reg; sono disponibili in commercio agenti antimicrobici utilizzati per migliorare l'igiene orale e prevenire l'infezione batterica. Tuttavia, pochi studi si sono concentrati sull'efficacia di AFC come una valida antimicrobico bocca risciacquo.
Lo scopo di questa indagine è stato quello di confrontare le proprietà antimicrobiche di clorexidina gluconato Alcohol-Free con altri bocca-risciacqui antimicrobici.
Metodi e materiali
specie di batteri densità ottica Misure:. Come microrganismi crescono, aumenta la torbidità del loro mezzo di crescita. misurando la torbidità del mezzo nel tempo, una curva di densità ottica possono essere generati. La curva riflette la crescita (aumento della concentrazione) dell'organismo di interesse Bioscreen PREPARAZIONE:. Nel primo esperimento quattro diluizioni, 5%, 1%, 0,1% e 0,01% in TSB, ciascuno di AFC, CHX e Biotene & reg; sono stati fatti. Le stesse diluizioni sono state effettuate con acqua distillata come controlli. I inoculums della sospensione batterica sono stati aggiunti i reagenti diluiti e brevemente in agitazione. Il secondo esperimento ha testato l'esposizione a breve termine di due diluizioni, 5% e 1% in TSB, ciascuno di AFC, CHX e Biotene & reg ;. Una diluizione 5% è stato fatto con acqua distillata come controllo. Inoculanti (1000 UL) della sospensione batterica sono stati centrifugati per 1 minuto a 13 ~ 000 rpm. I reagenti di test (1000 uL) sono stati poi aggiunti al pellet batterico e vortexate. Tutte le diluizioni sono stati lasciati per impostare a temperatura ambiente per 30 minuti. Ciascuno è stato poi centrifugato, seguita dalla rimozione del reagente, lavare MTSB, vortex e centrifugare. Il pellet formata è stata poi sospesa nel 1000 uL MTSB e in agitazione I reagenti nel terzo esperimento sono stati non diluito (100%) di soluzioni di AFC, CHX, Biotene & reg.; e acqua distillata. Nel quarto esperimento erano soluzioni diluite di AFC, CHX, Biotene & reg; e acqua e quattro diluizioni, 1%, 5% distillata, 11,6% e 15%, ciascuna di alcol. In entrambe le prove inoculums (1000 UL) della sospensione batterica sono stati centrifugati per 1 minuto a 13 ~ 000 rpm. I reagenti di prova (1000 UL) sono stati poi aggiunti al pellet batterico, vortexate e tutte le diluizioni sono stati lasciati per impostare a temperatura ambiente per 5 minuti. Ciascuno è stato poi centrifugato, seguita dalla rimozione del reagente, lavare MTSB, vortice e infine centrifugato. Questo è stato poi ripetuto, completando un secondo lavaggio con MTSB, una centrifuga finale e, infine, la sospensione nel 1000 uL di MTSB La preparazione Bioscreen finale esperimenti 1, 2, 3, e 4, consisteva di aliquote (200 uL) dei batteri in combinazione con la bocca-colluttorio, AFC, CHX, Biotene & reg ;, acqua distillata e TSB essere immessi in pozzetti a nido d'ape (Fig. 2) cedevole 90, 40, 25 e 45 campioni rispettivamente. Ogni porzione è stata erogata cinque volte, in differenti pozzetti, per garantire uniformità e riproducibilità. olio minerale (0,1 mL) sono stati poi dispensati gocce in ciascun pozzetto per evitare l'evaporazione. I pozzi a nido d'ape sono stati poi inseriti nella crescita Analyzer Bioscreen microbiologico per 24 ore ad una vasta gamma di banda di lunghezze d'onda di 420 nm a 580 nm per monitorare i cambiamenti nella densità ottica. curve di crescita e tempo di raddoppio sono stati quindi calcolati RESULTSExperiment # 1: La crescita di S. mutans è stata completamente inibita a concentrazioni di AFC e CHX 5% e 1% (figg.3 & amp; 4).. I batteri sono stati uccisi e sono stati notati cambiamenti significativi nella densità ottica (OD). Alle stesse condizioni, la crescita batterica è verificato in tutte le altre diluizioni (Figg 5 & amp;. 6). La crescita più importante si è verificato nel 1% Biotene & reg; diluizione con un diametro esterno max = 1.383 e un tempo di raddoppio (Td) = 1,4734 hr. Questo è stato seguito dal 0,01% Biotene & reg; diluizione con un max OD = 1.328 e un hr Td = 1,3053. Il più grande tempo di raddoppio è stato 0,01% CHX a 2,1013 hr. Le diluizioni di AFC e CHX bocca-risciacqui che erano inefficaci nell'inibire la crescita batterica avevano un diametro esterno di circa 1,3 nm, che era simile alla densità ottica del Biotene & reg; ed i controlli Experiment # 2:. Tempo di generazione e OD max erano simili per tutte le diluizioni dei diversi reagenti. La crescita ha cominciato a circa due ore per ogni diluizione. Sembra essere stata una inibizione della crescita rispetto all'esperimento incubazione iniziale, tuttavia, i reagenti non sono efficaci, e batteri crescevano ancora (Fig. 7) Esperimento # 3:. I comandi, H2O e TSB, non uccidere i batteri e nemmeno Biotene & reg; un tempo OD max e la generazione di 0,891 e 1,5516 ore, rispettivamente. esposizione a breve termine di non diluito CHX crescita completamente inibita di S. mutans. AFC ha inibito la crescita batterica SM per sei ore, momento in cui ci sembrava essere la crescita batterica. Il tempo massimo OD e raddoppiando erano 1.288 e 1,1213 ore, rispettivamente. La OD massima e tempo di generazione per Biotene & reg; erano 0,891 e 1,5516 HR, rispettivamente, (fig.8) Experiment # 4:. Cinque minuti a esposizione a breve termine di non diluito AFC e clorexidina ha inibito la crescita di S. mutans. La crescita batterica si è verificato in tutti gli altri reagenti e diluizioni di alcool con la crescita più notevole che si verificano in non diluito Biotene & reg; (OD max = 1.629) seguito da 1% di etanolo (OD max = 1.598). Il più grande tempo di raddoppio è stato del 5% di etanolo a 1.706 ore (Fig.9). DISCUSSIONThe osservazioni e risultati in questa indagine suggeriscono che la clorexidina senza alcool è un efficace bocca risciacquo nel sopprimere la crescita di S. mutans . Il primo esperimento testato la crescita dei batteri in presenza di differenti diluizioni (5%, 1%, 0,1%, 0,01%) dei reagenti testati. Dal primo esperimento, è stato osservato che a partire da 1% AFC e CHX erano efficaci nell'inibire la crescita dei batteri. Biotene & reg; non ha inibito la crescita microbica e l'esito dei controlli, acqua distillata e MTSB, erano come previsto, si è verificato nessun omicidio. Dopo la prima prova, la seconda consisteva di indagare il risultato di batteri espongono al 1% e 5% diluizioni di collutori antimicrobici per 30 minuti. tempo di generazione e OD max erano simili per ambedue le diluizioni dei diversi reagenti. Inoltre, non risulta essere stata una inibizione della crescita rispetto all'esperimento incubazione iniziale la crescita dei batteri è stata ritardata. Tuttavia, i reagenti non sono stati efficaci, e le mutans S. ancora cresciuto. L'intenzione per il terzo esperimento è stato quello di simulare una situazione più clinica. Le S. mutans sono stati esposti al diluiti antimicrobici bocca-risciacqui, AFC, CHX, Biotene & reg ;, e acqua distillata per 5 minuti. La diluito CHX contenente alcol completamente inibito la crescita di S. mutans. Al contrario, l'AFC ha inibito la proliferazione batterica per 6 ore, momento in cui ci sembrava essere crescita dei batteri. A questo punto, la contaminazione da altri microbiota era sospettato nella AFC bocca risciacquo. Per questo motivo, l'esperimento è stato ripetuto. Inoltre, se l'alcool è una variabile confusione doveva essere determinata. Questo quarto studio ha dimostrato che dopo l'esposizione 5 minuti per non diluiti antimicrobici bocca-risciacqui e diverse diluizioni di alcol non vi era alcuna crescita batterica sia il reagente AFC o il reagente CHX. Inoltre, le diluizioni alcol non inibiscono la crescita dei mutans S. Sebbene l'ultima prova dimostra che non vi è alcuna differenza di efficacia tra AFC e CHX contenente alcol, sono necessari ulteriori studi.; (1) per determinare la differenza nella formulazione e (2) i meccanismi che determinano l'inibizione dei batteri tra AFC e CHX contenente alcol; e clinicamente testare e confermare la coerenza dei risultati visualizzati in questo studio. I dati attuali suggeriscono che vi è un solo studio clinico dimostrare l'efficacia di AFC rispetto alla inibizione della placca. I risultati di questo studio sono stati coerenti con questo Nel confronto Yokoyama & rsquo;. S studio (2009), Biotene & reg; è stato trovato per essere efficace nell'inibire la crescita di actinomycetemcomitans Aggregatibacter, una specie di batteri. Tuttavia, in questo progetto di ricerca è stato inefficace contro S. mutans. Forse Biotene è efficace contro specie batteriche che si occupano prevalentemente anaerobico e ha trovato subgengivale. Se questo fosse il caso, si può postulare che Biotene sarebbe meglio essere servito come antibatterico bocca sciacquare per malattia parodontale, mentre, CHX bocca-risciacqui dovrebbero essere riservati principalmente per la prevenzione della carie. CONCLUSION1) Alcohol-Free clorexidina è efficace nel sopprimere la crescita batterica di S. mutans e, quindi, è una valida alternativa all'alcol contenenti clorexidina. 2) L'alcol non facilita le proprietà antimicrobiche di Chlorhexidine.OH Rebecca Cohen, DDS, Paed Cert, FRCD (C), classe 2011; Faculty Advisor, Casey Chen, BDS, PhD, DDS Ringraziamenti: Dott. Chen Casey per il suo incoraggiamento e Jason Jee e Christine Hwang per il loro aiuto e sostegno. Questo lavoro di ricerca è presentata in adempimento parziale dei requisiti per il completamento del programma di odontoiatria pediatrica avanzata alla Herman Ostrow Scuola di Odontoiatria di USC. REFERENCES1. Bolanowski SJ, Gescheider GA, Sutton SV. Relazione tra dolore orale e la concentrazione di etanolo in collutori. J parodontale Res 30: 192-197, 1995. 2. Eldridege et al. L'efficacia di un alcool collutorio clorexidina come agente antimicrobico. Il journ di Pro Dent 80 (6): 685-690, 1998. 3. Flotra L, P Gjermo, Rolla G, effetti Waerhaung J. collaterali di colluttori clorexidina. Scan J Dent Res 79: 119-125, 1971. 4. Gunsolley JC. L'efficacia clinica di collutori antimicrobici. Journal of Dentistry 38: S6-S10, 2010. 5. Kocak MM, Ozcan S, S Kocak, Topuz O, Erten H. Confronto tra l'efficacia di tre differenti soluzioni mouthrinse in diminuzione dello Streptococcus mutans nella saliva. Eur J Dent 3: 57-61, 2009. 6. Lassiter MO, Newsome AL, Sams LD, Arnold RR. Caratterizzazione di interazione con lattoferrina Streptococcus mutans. J Dent Res 66: 480-485, 1987. 7. Loe H, Schiøtt CR. L'effetto di collutori e applicazione topica di clorexidina sullo sviluppo della placca e gengiviti nell'uomo. J Perio Res 5: 79-83, 1970. 8. Screenivasan P, biocidi Gaffar A. antiplacca e resistenza batterica: una revisione. J Clin Periodontol 29: 965-974, 2002 9. Smith RJ, Moran J, M Addy, Dohery F, Newcombe RG. colorazione comparata in vitro e placca proprietà inibitorie in vivo di 0,12% e lo 0,2% clorexidina collutori. Journal of Clin Perio. 22 (8): 613-617, 1995. 10. Tenovuo, J. Applicazioni cliniche delle proteine antimicrobiche ospitanti Lattoperossidasi, lisozima e lattoferrina in xerostomia: efficacia e sicurezza. Malattie orali 8: 23-29, 2002. 11. Van Strydonck DAC, Timmerman MF, van der Velden U, van der Weijden GA. l'inibizione della placca di due collutori alla clorexidina commervcally disponibili. J Clin Periodontol32: 305-309, 2005. 12. Warde et al. Uno studio di fase II Biotene nel trattamento della xerostomia postradiation in pazienti con cancro della testa e del collo. Suppor cura del cancro 8: 203-208, 2000. Bioscreen Riferimenti 1. D & rsquo; Arrigo M, Garcia de Fernando GD, Velasco de Diego R, Ordonez JA, George SM, Pin C. Misura indiretta della distribuzione ritardo di singole cellule di Listeria innocua negli alimenti. Appl Environ Microbiol 72: 2533-8, 2006. 2. Francois K, Devlieghere F, Standaert AR, Geeraerd AH, che riesco, Van Impe JF, Debevere J. I fattori ambientali che influenzano il rapporto tra densità ottica e di cellule per Listeria monocytogenes. J Appl Microbiol 99: 1503-1515, 2005. 3. Metris A, George SM, Baranyi J. Uso di tempi di rilevamento della densità ottica per valutare l'effetto di acido acetico sulla cinetica unicellulari. Appl Environ Microbiol 72: 6674-6679, 2006. 4. Murakami C, Kaeberlein M. Quantificare lievito durata cronologico per conseguenza di cellule invecchiate. JoVE. 27. http://www.jove.com/index/Details.stp? ID = 1156, doi: 10.3791 /1156
: I batteri selezionati per questo studio è trovato per via orale nella saliva, le superfici dei tessuti molli e all'interno del biofilm dentale; Streptococcus mutans (GS5 ceppo)
crescita di microrganismi possono essere misurati dalla Automated crescita curva di analisi del sistema Bioscreen C (Fig. 1). Bioscreen C è un computer controllato incubatore /lettore /agitatore. Ha 8 filtri che vanno da 405nm a 600nm tra cui un filtro a larga banda e utilizza una micropiastra a nido d'ape per misurare le variazioni di densità ottica in funzione del tempo per produrre le curve di crescita microbiologica.
Quattro esperimenti unici sono stati condotti test di 0,12% clorexidina alcol-free (AFC), 0,12% clorexidina gluconato (CHX), e Biotene & reg ;, bocca-risciacqui orali. Tutti i reagenti microbici sono stati filtrati con 0,22 millimetri filtro micropori. L'acqua distillata è stato utilizzato come controllo negativo, mentre un mezzo di coltura sterili, brodo di soia Trypticase (TSB) integrato con estratto di lievito, è stato utilizzato come controllo positivo. S. mutans (SM ceppo GS5) era coltivati su 1,5% dei triptone brodo di soia integrato con 0,3% di estratto di lievito, 0,75% di Bacto-agar e calore inattivato siero di cavallo 2,5% ed incubate per 24 ore a 37 & deg; C. Fresh MTSB (900 uL) è stato inoculato con i batteri (100 uL) e alla sospensione sono stati aggiunti gli agenti di test microbici e acqua distillata.
.
.