Abstract
sfondo
Gli effetti della lingua di pulizia per la ricostruzione della flora batterica nella placca dentale e la lingua stessa rivestimento sono oscuri. Abbiamo valutato i cambiamenti delle quantità di batteri totale così come Fusobacterium nucleatum
nel rivestimento lingua e campioni di placca dentale ottenuti con e senza pulizia della lingua.
Metodi
Abbiamo condotto uno studio crossover esaminatore-cieco randomizzato con 30 volontari (media 23,7 ± 3,2 anni), senza periodontite. Dopo aver diviso casualmente in 2 gruppi, 1 gruppo è stato istruito per pulire la lingua, mentre l'altro no. Nei giorni 1 (basale), 3, e 10, rivestimento lingua e campioni di placca dentale sono stati raccolti dopo la registrazione punteggio rivestimento lingua (Winkel indice di rivestimento lingua: WTCI). Dopo un periodo di washout di 3 settimane, gli stessi esami sono stati eseguiti con i soggetti assegnati al gruppo alternativo. Il DNA genomico è stato purificato da campioni e applicato a SYBR® verde a base di real-time PCR per quantificare la quantità di batteri totali e F. nucleatum
.
Risultati
Dopo 3 giorni, il WTCI punteggio recuperato per basale, se la quantità di batteri totali nel rivestimento lingua era significativamente più bassa rispetto al basale. In campioni di placca, gli importi batteriche il giorno 3 e 10 erano significativamente più bassi rispetto alla linea di base con e senza pulizia della lingua. Analisi delle componenti principali ha mostrato che le variazioni di quantità batteriche nel rivestimento lingua e campioni di placca dentale sono indipendenti l'uno dall'altro. Inoltre, abbiamo trovato una forte associazione tra quantità di batteri totali e F. nucleatum
in campioni di entrambi.
Conclusioni
pulizia della lingua ridotto la quantità di batteri nel rivestimento lingua. Tuttavia, la pulizia aveva alcun contributo ovvio per inibire la formazione della placca dentale. Inoltre, il recupero della somma batterica totale indotto un aumento F. nucleatum
sia rivestimento lingua e placca dentale. Pertanto, si raccomanda che la pulizia della lingua e lo spazzolamento dei denti dovrebbero entrambi essere eseguiti per la promozione della salute orale
materiale supplementare elettronica
La versione online di questo articolo (doi:.. 10 1186 /1472-6831-14- 4) contiene materiale supplementare, che è disponibile per gli utenti autorizzati.
Sfondo
La lingua dorso occupa vasta area di mucosa orale è in grado di ospitare microrganismi inclusi i batteri parodontopatogeni oltre a streptococchi orali [1-4]. Inoltre, la lingua della mucosa è un importante habitat di Candida
specie, che possono causare infezioni gravi in pazienti immunocompromessi, come i pazienti nel periodo perioperatorio o costretti a letto anziani [5]. Tali microrganismi aggregano con epitelio mucosale distacco, così come componenti alimentari e saliva, e altri, e coprire la superficie della lingua per formare il cosiddetto rivestimento lingua. E 'stato riportato che i tassi di rilevamento di batteri parodontopatogeni in rivestimento lingua sono strettamente associati con quelli nella placca dentale [6] e condizioni parodontali [4, 7-9]. Inoltre, a seguito della perdita di tutti i denti naturali, vi è una minore prevalenza di batteri parodontopatogeni selettivi sulla lingua [8, 10, 11]. Inoltre, durante i periodi di astenersi da igiene orale, batteri parodontopatogeni nel rivestimento lingua aumentano insieme con l'accumulo [12]. Sulla base di tali constatazioni, si ritiene che il rivestimento lingua e placca dentale hanno un rapporto serbatoio e accettatore di condividere i microrganismi orali, e probabile che la pulizia della lingua ha qualche effetto sulla formazione della placca. Tuttavia, gli studi che hanno indagato pulizia della lingua allo scopo di ridurre la formazione della placca dentale hanno riportato risultati contrastanti. Gross, et al., Osservata una riduzione della quantità di adesione della placca dopo linguetta pulizia [13], che Badersten, et al., Riferito che la pulizia della lingua non ha inibito la formazione di placca [14]. Inoltre, altri studi che hanno utilizzato metodi di coltura trovato un lieve o nessuna diminuzione della carica batterica, anche sul dorso della lingua, quando è stato ridotto il grado di rivestimento di lingua [15-17]. Pertanto, la pulizia della lingua è raramente consigliato da professionisti del settore per la salute orale dei singoli comuni, ad eccezione per la prevenzione del cattivo odore orale [18-20]. Nel presente studio, abbiamo utilizzato un disegno crossover e variazioni rispetto nei batteri importi totali in dentale campioni di rivestimento di placca e di lingua ottenuti da soggetti con e senza pulizia con reazione a catena della polimerasi (PCR) test di lingua.
Precedenti studi hanno riportato un rapporto tra periodontopathogens in rivestimento lingua e le condizioni parodontali [7-9], suggerendo che gli organismi parodontopatogeni nel rivestimento lingua così come la placca dentale sono un fattore importante nella eziologia delle malattie parodontali. Porphyromonas gingivalis
, Treponema denticola
, e Tannerella forsizia
, noto come il complesso rosso, sono ritenuti essere i batteri parodontopatogeni prominenti. Queste specie sono raramente rilevati nella placca dentale o mucosa orale da individui senza parodontite [4, 7, 9]. Rispetto a quelli, Fusobacterium nucleatum
, che è stato anche implicato nell'eziologia delle malattie parodontali, è spesso isolato dal rivestimento lingua e campioni di placca dentale a prescindere dalla condizione parodontale [4, 21, 22]. Questa specie rappresenta un ponte tra colonizzatori precoce e tardiva nella placca dentale, dal momento che può co-aggregazione con vari batteri orali comprese le specie complesse rossi [23-25]. E 'stato anche riferito che F. nucleatum
crescita dipende da un aumento dello spessore della placca cedere condizione anaerobica [26]. Inoltre, F. nucleatum
sotto ossigenato e CO ambienti
2-impoverito supporta la crescita di P. gingivalis,
quindi è possibile che la sua colonizzazione innesca parodontopatogeni colonizzazione batterica [27, 28]. Di conseguenza, si ritiene che la quantità di F. nucleatum
può essere utilizzata per rappresentare l'eziologia microbica della placca dentale e rivestimento lingua per malattie parodontali in individui senza periodontite. Nel presente studio, abbiamo valutato cambiamenti eziologici, oltre a variazioni quantitative di rivestimento lingua e placca dentale in ri-costruzione attraverso la determinazione della quantità di F. nucleatum
in campioni raccolti, nonché su importo totale dei batteri, e esaminato la relazione tra tali importi.
Metodi
soggetti
I soggetti sono stati 30 sistemiche volontari sani (età media 23,7 ± 3,2 anni, range 20-34 anni) senza parodontite clinici e senza denti mancanti che non sono stati sottoposti a antibiotico o altro antimicrobico la terapia entro 3 mesi prima dell'esame. Hanno ricevuto informazioni verbali e scritte sullo studio, e firmato i moduli di consenso prima della partecipazione. Il protocollo di studio è stato approvato dai comitati etici di Iwate Medical University School of Dentistry (# 01140).
Studio di design
Questo studio è stato uno, esaminatore disegno randomizzato cieco e crossover con un periodo di tre settimane di wash-out tra le fasi di crossover . Nella linea di base prima fase di test, depositi rivestimento lingua in tutti i soggetti sono stati valutati visivamente. Dopo aver raccolto rivestimento lingua e campioni di placca dentale, i soggetti sono stati divisi casualmente in 2 gruppi. Un gruppo è stato incaricato di pulire meccanicamente le loro lingue con un detergente lingua usa e getta dotata di testa detergente composto da una spugna uretano coperto con un tessuto non tessuto (Tongue Clean®, JCB Industry Limited, Giappone) fino a quando l'esaminatore ha confermato visivamente che il rivestimento lingua era completamente rimosso. L'altro gruppo ha eseguito nessuna pulizia della lingua. Tutti i soggetti hanno continuato la loro igiene orale abituale e sono stati istruiti a non pulire la lingua con qualsiasi mezzo durante questa fase del periodo di prova. Tre e 10 giorni più tardi, le valutazioni rivestimento lingua e raccolta di rivestimento lingua e campioni di placca dentale sono stati eseguiti nello stesso modo come per l'esame basale. valutazioni rivestimento lingua e le collezioni di campioni sono stati fatti allo stesso tempo, ogni giorno dell'esame (approssimativamente tra le 16:00 e le 17:00). Poi, un periodo di washout è stata condotta per 3 settimane, durante il quale i soggetti hanno eseguito il loro normale igiene orale senza pulizia della lingua. Dopo il periodo di washout, i soggetti sono stati assegnati al gruppo alternativo e il protocollo è stato ripetuto. valutazioni rivestimento lingua e campionamento di campioni orali sono stati eseguiti dallo stesso singolo esaminatore rispettivamente nel corso dello studio, che non era a conoscenza della dotazione gruppo dei soggetti.
valutazione rivestimento lingua
rivestimento lingua è stata valutata utilizzando l'indice Winkel rivestimento di linguetta (WTCI) [29]. Brevemente, il dorso della lingua è stata divisa in 6 aree (3 posteriori, 3 anterior) e rivestimento lingua è stata valutata in ciascun sestante come segue; 0 = nessun rivestimento, 1 = rivestimento leggero, 2 = rivestimento grave. Il WTCI è stato ottenuto sommando tutti i punteggi 6, per una possibile serie di 0-12.
Rivestimento lingua e dei denti di campionamento placca
Dopo aver rimosso la saliva dal dorso lingua con cotone e un flusso di aria, qualunque accrescimento lingua tra le papille linguali è stato accuratamente rimosso con 3 colpi graffi (lungo circa 1 cm) con uno sterile micro-spatola dalla zona posteriore-centrale del dorso della lingua. Il giorno 3, rivestimento lingua è stato raccolto in modo analogo da destra o sinistra (scelto a caso) una distanza di 0,5 cm dalla zona di campionamento utilizzato per la linea di base. Il giorno 10, rivestimento lingua era ugualmente raccolto dal lato opposto di quello utilizzato al giorno 3. campioni di placca dentale sono stati raccolti anche dopo essiccazione con cotone utilizzando un esploratore dentale sterile le intere superfici linguali del primo molare e secondo premolare su entrambi i lati della mandibolare per i provini di base. Successivamente, campioni di placca sono stati ricavati dalle superfici dei denti su entrambi i lati scelti a caso il giorno 3 e dall'altro lato il giorno 10. Subito dopo la determinazione del peso a umido con una bilancia elettronica (AG245, Mettler Toledo, Greifensee, Svizzera), i campioni sono stati immerso in soluzione salina tamponata con fosfato (PBS, pH 7,0) e lavato per 3 volte, quindi congelate a -80 ° C per la conservazione. Dal momento che la placca dentale è stato raccolto da entrambe le parti, i valori di peso bagnato e batteri alla linea di base sono stati stimati come le mezze quantità di valori misurati.
Estrazione del DNA e la quantificazione
DNA è stato estratto da campioni utilizzando un Wizard® DNA genomico Purificazione Kit (Promega, Fitchburg, WI, USA), secondo le istruzioni del produttore per isolare DNA genomico da gram Gram-positivi batteri. DNA genomico batterico è stato sciolto in tampone TE (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8,0) e conservato a 4 ° C
. Quantificazione di specie biofilm mediante Real-time PCR
primer specifici sono stati utilizzati, come segue. Per 16S rRNA universale, in avanti: TGG AGC ATG TGG TTT AAT TCG A e retromarcia: TGC GGG ACT TAA CCC AAC A [30], per F. nucleatum
ATCC25586, in avanti: GCG GAA CTA CAA GTG TAG AGG TG e retromarcia : GTT CGA CCC CCA ACA CCT ATTO A [31]. La temperatura di ricottura per entrambi era di 60 ° C. Quantificazioni di specie universale e F. nucleatum
nei campioni sono state effettuate da real-time PCR utilizzando tinture SYBR® verde per rilevare gli ampliconi del gene 16S rRNA. Ogni miscela di reazione (volume finale, 20 ml) conteneva 1 ml (1 ng) di template, 7 ml di acqua ultrapura, 10 ml di SYBR® Premix Ex Taq ™ II (Perfetto Real Time), e 1 ml ciascuno degli avanti e primer (10 micron) inverso. Real-time PCR è stata eseguita con un tempo reale Thermal Cycler sistema PCR Dice® (Takara, Giappone) utilizzando il seguente ciclo termico raccomandate per la miscela SYBR® Premix Ex Taq ™ II: 95 ° C per 30 secondi, quindi 40 cicli per 5 secondi a 95 ° C e 1 minuto a 60 ° C.
curve di dissociazione sono state generate incubando i prodotti di reazione a 95 ° C per 15 secondi ea 60 ° C per 30 secondi, e poi gradualmente aumentando la temperatura a 95 ° C per 15 secondi. dati di fluorescenza sono stati raccolti al termine della fase di ricottura C Primer 60 ° per 40 cicli di amplificazione e tutta l'analisi della curva di dissociazione. Una curva standard è stata generata sulla base del peso noto di DNA genomico purificato da E. coli ATCC 53868
e F. nucleatum
ATCC 25586. Il peso del DNA genomico per 16S rRNA universale e F. nucleatum
sono stati considerati in modo da riflettere la quantità di batteri totali e F. nucleatum
, rispettivamente. Dalle misure, abbiamo calcolato quantità di batteri in ogni campione intero raccolto e gli importi per un certo campione (1 mg).
Analisi statistica
Tutti i valori esclusi WTCI sono stati trasferiti in logaritmi per migliorare la normalità. Le variabili sono state applicate le seguenti analisi dopo aver confermato la normalità utilizzando un campione di test Kolmogorov-Smirnov. Le differenze di quantità di batteri tra i giorni d'esame sono stati esaminati utilizzando un t-test accoppiato con regolazione Bonferroni. analisi di correlazione di Pearson è stato utilizzato per esaminare la relazione tra 2 variabili. Inoltre, l'analisi delle componenti principali è stata effettuata per esaminare le relazioni tra più misurazioni. Inoltre, la quantità di batteri totali nei giorni 3 e 10 come rapporti alla linea di base sono stati confrontati tra i gruppi con e senza la pulizia utilizzando un test di Wilcoxon lingua. Le analisi statistiche sono state effettuate utilizzando IBM SPSS ver. 20.0, con le differenze considerate statisticamente significativa con p
. & Lt; 0,05
Risultati e discussione
misurazioni di base
Al basale, non vi erano differenze significative per WTCI, quantità di rivestimento lingua raccolto e placca dentale campioni, e le quantità di batteri totali e F. nucleatum
in campioni raccolti interi così come quelli nei campioni 1-mg tra soggetti con e senza lingua pulizia (Tabella 1). Inoltre, non vi erano differenze significative per tali parametri tra il primo e secondo misurazioni di riferimento dopo il periodo di washout di 3 settimane (dati non mostrati). Questi risultati hanno mostrato che gli abitanti orali tornati ai livelli basali in materia di importi e carica batterica durante il periodo di washout, indicando che 3 settimane era sufficiente per questo crossover misurazioni study.Table 1 linea di base per il rivestimento della lingua e campioni dentali placca
pulizia della lingua
± DS
p-value medio *
WTCI
(+)
5.53 ± 4.53
0.651
(-)
5.90 ± 3.59
totale
5.72 ± 4.06
peso umido di rivestimento lingua (mg)
(+)
15,4 ± 10,1
0.125
(-)
12.0 ± 8.06
totale
13,6 ± 9,20
peso fresco di placca dentale (mg)
(+)
2,75 ± 7,83
0.375
(-)
1.31 ± 1.42
totale
2.03 ± 5.63
quantità di batteri totali nel campione intero rivestimento lingua (pag log )
(+)
4.76 ± 1.18
0,296
(-)
4.52 ± 1.15
totale
4.64 ± 1.16
quantità di batteri totali nel campione di tutta la placca dentale (log pg)
(+)
4,47 ± 0,79
0,986
(-)
4.47 ± 1.10
totale
4.46 ± 0.95
quantità di F. nucleatum
in campione di rivestimento lingua intera (pg log)
(+)
2.19 ± 1.18
0,199
(-)
1.94 ± 1.27
totale
2.07 ± 1.22
quantità di F. nucleatum
in tutto il campione di placca dentale (pag log)
(+)
2.07 ± 1.00
0,664
(-)
1.98 ± 1.23
totale
2.02 ± 1.11
quantità di batteri totale in 1 mg di rivestimento lingua (log pg /mg)
(+)
3.68 ± 1.02
0,536
(-)
3.56 ± 0.96
totale
3.62 ± 0,98
quantità di batteri totale in 1 mg di placca dentale (log pg /mg)
(+)
4.51 ± 0.61
0,361
(-)
4.44 ± 0.83
totale
4.48 ± 0.72
quantità di F. nucleatum
nel campione di rivestimento lingua (log pg /mg)
(+)
1.26 ± 0.93
0,668
(-)
1.13 ± 0.99
totale
1.20 ± 0.96
quantità di F. nucleatum
nel campione di placca dentale (log pg /mg)
(+)
2.09 ± 0.97
0,343
(-)
1.90 ± 1.06
totale
2.00 ± 1.01
* confronti statistici tra soggetti con e senza pulizia della lingua sono stati eseguiti utilizzando un test t accoppiato per WTCI e gli importi batteriche. Il confronto dei pesi bagnate di campioni sono state eseguite utilizzando un test di Wilcoxon, in quanto non sono stati distribuiti normalmente.
Il volume di rivestimento lingua era maggiore di placca dentale, mentre le quote di entrambi i batteri totali e F. nucleatum
nel campioni di 1 mg erano maggiori in quelli di placca dentale. Questi risultati hanno mostrato che la densità di batteri totali e F.
nucleatum era più alto nella placca dentale di rivestimento lingua alla linea di base. Inoltre, F. nucleatum
è stato rilevato in tutti i campioni di rivestimento lingua e placca dentale raccolti presso la linea di base.
Cambia in quantità di batteri totali nel rivestimento lingua e placca dentale seguente
pulizia in soggetti che si sono esibiti lingua pulizia della lingua, la quantità media di batteri totali in interi campioni raccolti rivestimento lingua era più basso il giorno 3 (4.11 ± 1.13 pg, media ± DS) rispetto al basale (4.76 ± 1.18 pg). il confronto intra-gruppo utilizzando un test t accoppiato hanno mostrato un p
-value per la differenza tra il giorno 3 e il basale inferiore a 0,01, che ha indicato una differenza statisticamente significativa nel confronti multipli dei 3 giorni di esame dopo aggiustamento Bonferroni. Un livello inferiore di batteri totale è stata osservata anche il giorno 10 (4.14 ± 1.30 pg), anche se la differenza rispetto al basale non era significativo (Figure1A). Al contrario, nei soggetti che non effettuano la pulizia della lingua, gli importi batterica totale non erano significativamente differenti tra i giorni d'esame (Figure1B). Figura 1 Variazione quantità di batteri totali nel rivestimento lingua dopo la pulizia della lingua. Le barre di errore indicano intervalli riservati 95%. I valori indicati in ambienti chiusi sono medie della quantità di batteri totali espressi come valori logaritmo del peso genoma di 16S rRNA universale in tutto campioni rivestimento lingua raccolti (A) dopo la pulizia della lingua e (B) senza pulizia della lingua. * Statisticamente significativo, più test accoppiato t con regolazione Bonferroni.
Per quanto riguarda il peso del genoma, la differenza tra il basale e il giorno 3 nel gruppo con la pulizia della lingua era 4,55 pg (valore reale). Il nostro esame preliminare ha dimostrato che con E. coli
ad un peso genoma di 1 ng corrispondeva a 3,6 × 10 4 CFU, quindi un peso di 4,55 pg è approssimativamente equivalente a 1,9 log CFU di E. coli
.
Quirynen et al. [16] hanno riportato che la riduzione della carica batterica sul dorso lingua dopo 6 mesi di pulizia giornaliera lingua era inferiore a 0,4 log CFU, che non era significativa rispetto al valore basale. Essi hanno anche suggerito che la difficoltà nel ridurre la carica batterica sulla lingua è dovuto alle caratteristiche superficiali del dorso lingua in cui esistono innumerevoli depressioni, come quella struttura fornisce nicchie ideali per l'adesione batterica e la crescita, e riparo dalle azioni di pulizia. Tuttavia, Bordas et al. [17] hanno riportato cambiamenti significativi nella carica batterica sul dorso della lingua seguenti 3 giorni di lingua raschiatura, con la riduzione che vanno 1,11-1,96 log CFU. La nostra scoperta sembra essere in accordo con quest'ultimo, anche se hanno usato un metodo di coltivazione. D'altra parte, quando si considerano le differenze di volume di campionamento e la frequenza di pulizia della lingua, la riduzione batterica singola pulizia della lingua era maggiore e continuato per un periodo più lungo di quello trovato in studio precedente. Real-time PCR è in grado di quantificare la quantità batterica totale compresi batteri non coltivabili con elevata sensibilità, che fino al 50% o più del microbiota in biofilm orale devono ancora essere successo coltura [32, 33]. Pertanto, le differenze tra gli studi attuali e precedenti possono essere derivate principalmente dai diversi metodi di rilevamento di batteri utilizzati.
Successivamente, per i confronti infragruppo, i tassi di somme batterica totale nei giorni 3 e 10 contro la linea di base sono stati confrontati tra i soggetti con e senza pulizia della lingua utilizzando un test di Wilcoxon. C'era una tendenza che i soggetti avevano più per una maggiore riduzione della carica batterica contro la linea di base in soggetti che pulivano la loro lingua, anche se la differenza non è risultata significativa (p = 0,106
). Inoltre, non vi era alcuna differenza tra i gruppi il giorno 10 (p = 0.478
). Pertanto, i risultati precedenti e presenti mostrano che l'effetto di pulizia della lingua sulla riduzione della quantità di batteri non è notevole, e non è chiaro se pulizia della lingua ha un effetto pratico per ridurre la carica batterica in tutta la cavità orale.
Altra mano, gli importi medi di batteri totali in tutto il raccolto campioni di placca dentale erano significativamente più bassi a 3 e 10 giorni dopo la rimozione, rispetto al valore basale, come mostrato da un test t accoppiato con regolazione Bonfferoni (Figure2A). Questo era vero anche in soggetti senza pulizia della lingua (Figure2B). Inoltre, un test di Wilcoxon eseguito in modo simile per analizzare rivestimento lingua rivelato non vi era alcuna differenza significativa tra i gruppi in entrambi i giorni (p = 0,280
il giorno 3, p = 0,380
il giorno 10). Insieme, questi risultati suggeriscono che la pulizia della lingua non contribuisce alla inibizione della formazione della placca dentale. Figura 2 Variazione quantità di batteri totali nella placca dentale dopo la rimozione. I valori indicati in ambienti chiusi sono medie della quantità di batteri totali espressi come valori logaritmo del peso genoma di 16S rRNA universale in tutto raccolti campioni di placca dentale (A) dopo la pulizia della lingua e (B) senza pulizia della lingua. Le barre di errore e gli asterischi sono gli stessi come in Figura 1.
Cambia nel punteggio WTCI dopo la pulizia
In contrasto con il profilo mutevole di importo batterica totale nel rivestimento lingua lingua, punteggio WTCI non ha mostrato una differenza significativa tra i giorni d'esame in entrambi i gruppi (Figura 3). Questi risultati concordano con uno studio di Chérel, et al., Il quale ha riferito che in media punteggi rivestimento lingua tornati ai livelli basali 2 giorni dopo la pulizia della lingua [34]. Altri rapporti hanno anche notato disaccordo tra variazione di carica batterica sulla lingua e la lingua punteggio rivestimento dopo la pulizia della lingua [15-17]. Così, componenti diversi microrganismi in rivestimento lingua sono generalmente valutati con un metodo di ispezione oculare. D'altra parte, lievi riduzioni WTCI rispetto alla linea di base, anche in soggetti senza pulizia della lingua nei giorni 3 e 10 sono stati notati, mentre una riduzione nella quantità di batteri totali in campioni di rivestimento lingua da soggetti senza pulizia della lingua è stata osservata anche (Figure1B ). Queste scoperte possono essere stati legati a naturale variazioni inter-giorno. Figura 3 Variazioni WTCI seguenti pulizia della lingua. I valori indicati in ambienti aperti sono medie in soggetti senza pulizia della lingua e quelli in ambienti chiusi sono medie nei soggetti con pulizia della lingua. Non ci sono state differenze significative tra i gruppi di soggetti o giorni di esame
. Gli importi di F. nucleatum
e batteri totali nel rivestimento lingua e dentale placca
per valutare spostamento eziologico, abbiamo esaminato i cambiamenti nella quantità di F. nucleatum
nel rivestimento lingua e campioni di placca dentale. Tre giorni dopo la pulizia della lingua, la quantità media di F. nucleatum
in rivestimento lingua è stata significativamente ridotta rispetto al basale (2.19 ± 1,18-1,75 ± 1,29 log pg; p = 0.006
). Quando la pulizia della lingua non è stata eseguita, non vi era alcuna differenza significativa tra il giorno 3 e la linea di base (1,94 ± 1,27 vs 2,02 ± 1,27 log pg; p = 0,726
). Inoltre, non vi era alcuna differenza tra con e senza la lingua di pulizia il giorno 10.
nella placca dentale, la quantità media di F. nucleatum
il 3 ° giorno è stata ridotta dopo la pulizia della lingua, ma non significativo (2.07 ± 1.00 a 1.88 ± 0.87 log pg; p = 0,145
). Una riduzione di F. nucleatum
il giorno 3 rispetto al basale è stata osservata anche in soggetti senza la lingua di pulizia (1,98 ± 1,23-1,59 ± 1,00 log pg; p = 0,019
), anche se la differenza non era significativa a confronti multipli utilizzando aggiustamento Bonferroni. Dato che i profili di cambiamento dopo la rimozione erano simili ai batteri totali, abbiamo analizzato il rapporto tra quantità di batteri totali e quella di F. nucleatum
nei campioni utilizzando l'analisi di correlazione di Pearson, e abbiamo trovato una significativa coefficiente di correlazione. Il livello di rapporto era costantemente elevato in entrambi i rivestimento lingua e placca dentale con tutte le condizioni di campionamento utilizzati nel presente protocollo (Figures4 e5). Questi risultati hanno dimostrato che F. nucleatum
occupato una certa percentuale di batteri totale sia rivestimento lingua e placca dentale sia durante lo sviluppo e in condizioni di stabilità. Inoltre, nel presente studio, F.
nucleatum è stato rilevato in tutti rivestimento lingua e campioni di placca dentale da individui sani parodontalmente, nei quali i tassi di rilevamento di batteri parodontopatogeni come le spezie complesse rossi sono spesso segnalati per essere estremamente basso [3 -6, 32]. Un altro rapporto ha notato che la colonizzazione di F. nucleatum
indotto rosso complesso abitazione specie legandosi colonizzatori sia precoce e tardiva nella placca dentale [24]. Inoltre, abbiamo riportato in precedenza una forte correlazione tra la placca dentale e rivestimento lingua per quanto riguarda la colonizzazione di spezie complesse rossi [6]. Pertanto, è possibile che un aumento nella quantità di F. nucleatum
in rivestimento lingua così come placca dentaria indica un ambiente che è accettabile per batteri virulenti, aumentando di conseguenza il rischio di periodontite. Tuttavia, non abbiamo determinare la presenza di specie complesso rosso, che è una limitazione di questo studio. Figura 4 Relazione tra quantità di batteri totali e F. nucleatum in rivestimento lingua. grafici a dispersione delle quantità di batteri totali (X-assi) e F. nucleatum
(assi Y) interamente campioni rivestimento lingua raccolti espressi come valori logaritmo del peso genoma (A) nel caso in cui con la pulizia della lingua e (B ) senza pulizia della lingua. circoli chiusi, cerchi aperti e triangoli mostrano valori ottenuti al basale, e giorni, rispettivamente, 3 e 10,. Solido, punteggiato, e le linee tratteggiate indicano linee rette approssimative per linea di base, e giorni, rispettivamente, 3 e 10,. I coefficienti di correlazione in soggetti con pulizia della lingua sono stati 0.746, 0.837, e 0.928 al basale, e nei giorni 3 e 10, rispettivamente, mentre quelle in soggetti senza pulizia della lingua erano 0,884, 0,844 e 0,896, rispettivamente.
Figura 5 Relazione tra quantità di batteri totali e F. nucleatum nella placca dentale. grafici a dispersione delle quantità di batteri totali (X-assi) e F. nucleatum
(assi Y) in interi raccolti campioni di placca dentale espressi come valori logaritmo del peso genoma (A) nel caso in cui con la pulizia della lingua e (B ) senza pulizia della lingua. I simboli sono gli stessi come in Figura 4. I coefficienti di correlazione in soggetti con pulizia della lingua sono stati 0.570, 0,849 e 0,870 al basale, e nei giorni 3 e 10, rispettivamente, mentre quelle in soggetti senza pulizia della lingua erano 0,952, 0,868 e 0,745, rispettivamente.
Rapporti complessivi di volume e carica batterica nel rivestimento lingua e dentale placca
Per rivedere le contraddizioni e le relazioni tra i risultati della valutazione degli studi attuali e precedenti, abbiamo effettuato un principio analisi delle componenti. Abbiamo applicato peso umido, e quantità di batteri totali (pg /mg) e di F. nucleatum
(pg /mg) sia in rivestimento lingua e campioni di placca dentale con WTCI punteggi all'analisi. Tabella 2 riassume i pesi fattoriali per le misurazioni dopo la rotazione Varimax. Il primo componente è stato fortemente associato con la quantità di batteri totali e F. nucleatum
nella placca dentale, e moderatamente con peso umido della placca dentale. Al contrario, il secondo componente è stato legato esclusivamente alla quantità di batteri totali e F. nucleatum
in lingua rivestimento. Il peso a umido di rivestimento lingua e WTCI formò un altro gruppo legato alla terza componente. Questi risultati indicano che le variazioni in quantità batteriche rivestimento lingua e campioni di placca dentale sono sostanzialmente indipendenti l'una dall'altra. Inoltre, i punteggi WTCI erano strettamente associati con il peso umido del rivestimento lingua. Lundgren, et al. anche trovato una forte correlazione tra peso umido di raschiatura lingua e WTCI [35]. D'altra parte, nel nostro studio, misure che hanno valutato il volume dei campioni orali mostrato debole a moderata associazione con quantità batteriche tra la variazione complessiva delle misurazioni. Questi risultati possono spiegare il disaccordo di cambiamenti dopo la pulizia della lingua tra gli importi batteriche e WTCI notato nel nostro study.Table 2 matrice componente dopo la rotazione Varimax seguente analisi principale per i campioni complessivi (n = 180)
Component
1
2
3
WTCI
.187
.202
.759
Wet peso del rivestimento lingua (log mg)
-.168
0,122
0,742
quantità di batteri totali nel campione di rivestimento lingua (log pg /mg)
.148
0,860
.301
quantità di F. nucleatum
in rivestimento lingua campione (log pg /mg)
0,068
0,957
.046
peso umido della placca dentale (log mg)
0,446
-.236
0,369
quantità di batteri totali nel campione di placca dentale (log pg /mg)
.900
.078
-.020
quantità di F. nucleatum
nel campione di placca dentale (log pg /mg) < Tutti gli autori hanno letto e approvato la versione finale del manoscritto.
