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Un metodo surrogato per l'analisi confronto delle concentrazioni salivari di prodotti xilitolo contenenti

 

Abstract
sfondo
xilitolo gomme da masticare ha dimostrato di ridurre Streptococcus mutans
livelli e decadimento. Due studi hanno esaminato il corso presenza e il tempo delle concentrazioni di xilitolo salivari consegnati tramite xilitolo contenenti pellet gomma e rispetto loro di altri prodotti contenenti xilitolo.
Metodi
Un entro soggetti disegno è stato utilizzato per entrambi gli studi. Studio 1, adulti (n = 15) ha ricevuto tre prodotti contenenti xilitolo (pellet gomma (2,6 g), orsetti gommosi (2,6 g), e disponibile in commercio bastone gomma (Koolerz, 3,0 g)); Studio 2, un secondo gruppo di adulti (N = 15) ha ricevuto tre prodotti xilitolo contenenti (pellet gum, gommosi, e uno sciroppo di xilitolo al 33% (2,67 g). Per entrambi i soggetti studi consumato un prodotto xilitolo per visita con 7 -day washout tra ciascun prodotto. Un protocollo standardizzato è stato seguito per ogni visita prodotto. fine articolo è stato determinato in modo casuale alla visita iniziale. campioni di saliva (0,5 ml a 1,0 ml) sono stati raccolti al basale e fino a 10 punti di tempo (~ 16 min di lunghezza) dopo il consumo del prodotto avviato. concentrazione di xilitolo in campioni di saliva è stato analizzato mediante cromatografia liquida ad alta prestazione. Area sotto la curva (AUC) per la determinazione della concentrazione media xilitolo nella saliva al periodo di campionamento totale è stato calcolato per ciascun prodotto.
Risultati
In entrambi gli studi, tutti e tre i prodotti xilitolo (studio 1: gomma di pellet, orsetti gommosi, e bastone da masticare; studio 2: gomma di pellet, orsetti gommosi, e sciroppo) aveva curve di tempo simili con due picchi di concentrazione durante il xilitolo periodo di campionamento. Studio 1 aveva le sue vette più alte media al punto di campionamento 4 min, mentre Studio 2 ha le sue vette più alte medie tra 13 a 16 minuti. livelli salivari xilitolo restituiti al basale a circa 18 minuti per tutte le forme testate. Inoltre, per entrambi gli studi l'AUC totale per i prodotti xilitolo erano simili rispetto alla gomma pellet (Studio 1: pellet gum - 51,3 μg.min /mL, orsetti gommosi - 59,6 μg.min /mL, e bastone gomma - 46,4 mcg. min /mL; Studio 2: pellet gum - 63,0 μg.min /mL, orsetti gommosi - 55,9 μg.min /mL, e sciroppo - 59.0 μg.min /mL)
Conclusione
Il metodo di confronto ha dimostrato alta. affidabilità e validità. In entrambi gli studi gli altri prodotti contenenti xilitolo avevano curve in tempo e significa picchi di concentrazione xilitolo simili a xilitolo pellet gomma suggerendo questo test può essere un surrogato per studi più lunghi confronto vari prodotti.
Peter Milgrom, Kiet A Ly, Marilynn Rothen, Gregory Mueller , Mary K Hagstrom, Ernie Tolentino, Lingmei Zhou e Marilyn C Roberts hanno contribuito ugualmente a questo lavoro
materiale supplementare elettronica
La versione online di questo articolo (doi:.. 10 1186 /1472-6831-8- 5) contiene materiale supplementare, che è disponibile per gli utenti autorizzati.
Sfondo
xilitolo, un alcool di zucchero naturale attualmente approvato per l'uso in alimenti, prodotti farmaceutici e prodotti per la salute orale in più di 35 paesi ha dimostrato di ridurre il cariogeni batteri e carie [1-5]; particolarmente consegnato da una gomma o losanga [6]. I nostri studi precedenti [2, 7] hanno segnalato dalla dose e la frequenza di utilizzo di xilitolo distribuito mediante pellet gomma da masticare minimamente efficace per ridurre Streptococcus mutans
, un agente patogeno carie. Si pensa che significativo effetto anti-carie di xilitolo è un risultato di soppressione costante S. mutans [8] e le modificazioni nella virulenza [9] dall'esposizione frequente e cronica a prodotti contenenti xilitolo. Anche se xilitolo gomma da masticare è efficace, nuovi modi innovativi per fornire xilitolo a livelli clinicamente efficace sono necessari perché la gomma da masticare è né sicura, per i più piccoli, e non accettabili, nelle scuole, negli Stati Uniti [6]. Tuttavia, studi clinici ripetuta a lungo termine dei vari veicoli xilitolo non sono realizzabili. Pertanto, lo sviluppo di un test surrogato di un sistema di erogazione xilitolo è garantito.
Ci sono stati due studi che esaminano livelli xilitolo salivari dopo l'assunzione di vari prodotti contenenti xilitolo nei bambini [10, 11], e nessuno negli adulti. Lif Holgerson et al [10] determinate le concentrazioni di xilitolo salivari nei bambini (età media 11,5 anni) dopo l'utilizzo di una varietà di prodotti contenenti xilitolo (gomme da masticare, pastiglie, caramelle, lavare, e un dentifricio al fluoro). Tutti i prodotti sono stati consumati in una sola seduta con un breve risciacquo di acqua distillata immediatamente dopo il consumo e 10 min di wash-out tra i prodotti xilitolo. Sembra che la saliva è stata raccolta dal pavimento della bocca con una pipetta. Ciò ha provocato recuperare una grande quantità di xilitolo nel prodotto ma il metodo è priva di qualsiasi fedeltà condizioni reali in cui la flora orale è esposto xilitolo. Inoltre, non è chiaro se la saliva è stata raccolta stesso modo dopo il consumo del prodotto xilitolo. I ricercatori hanno scoperto che i prodotti xilitolo elevate concentrazioni salivari xilitolo tra gli otto ei 16 minuti dopo l'uso del prodotto xilitolo. Tapiainen et al [11], in un secondo studio, ha trovato concentrazioni di xilitolo salivari nei bambini in età prescolare sono stati immediatamente elevati dopo gomme da masticare o quando uno sciroppo xilitolo è stato spruzzato in bocca con una siringa, ma erano rilevabili dopo 15 minuti. La saliva è stata raccolta in modo diverso a seconda dell'età del bambino; minorenne 3 saliva sono stati raccolti direttamente dalla bocca tramite una pipetta, mentre i bambini di età 4 e sputò anziani attraverso un imbuto in provette. Non è chiaro come e quando saliva sono stati raccolti durante la somministrazione xilitolo in questi bambini, come il protocollo non è dettagliata. Per entrambi gli studi, le concentrazioni di xilitolo salivari sono stati determinati mediante saggio enzimatico utilizzando una procedura basata deidrogenasi poliolo (Boehringer Mannheim, Germany). Il test ha un limite di rilevazione di circa 200 ng /mL.
Questo documento descrive un metodo valido e affidabile per confrontare concentrazioni xilitolo salivari durante l'uso di xilitolo contenenti prodotti utilizzando un metodo standardizzato e potente di analisi chimica, cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC). HPLC è un metodo per separare, identificare e quantificare i composti in un campione. E 'stato utilizzato in precedenza per misurare xilitolo e altri alcoli zucchero in gomma e prodotti dolciari [12, 13]. Per il saggio HPLC, il limite inferiore di rilevamento di xilitolo, utilizzando la curva standard, è 0,2 ng /mL. La validità è la misura in cui un test misura accuratamente il fenomeno desiderato esso tenta di misurare [14]. L'affidabilità è la misura in cui il test è d'accordo, dove accordo può avvenire in due periodi di tempo (ad esempio, test-retest), tra forme analoghe dello stesso test, tra le singole sezioni di una prova o tra diversi valutatori [15- 17]. sono descritti Due studi riguardanti il ​​corso presenza e il tempo di xilitolo nella saliva distribuito mediante una varietà di prodotti contenenti xilitolo. Questo articolo esamina in particolare la presenza e l'andamento nel tempo (picco e la durata della quantità rilevabili) delle concentrazioni di xilitolo nella saliva per xilitolo gomma da masticare (pellet e bastone forme), orso xilitolo gommosa, e sciroppo di xilitolo; e mette a confronto la curva totale xilitolo-saliva corso tempo (area sotto la curva) di xilitolo pellet gomma da masticare per una gomma xilitolo bastone disponibile in commercio, orso xilitolo gommosa e sciroppo di xilitolo.
Metodi
Design in due studi sono stati condotti utilizzando un disegno entro soggetti per ogni studio (vedi figura 1). Figura 1 entro soggetti disegno dello studio utilizzato per gli Studi 1 e 2. I soggetti
Compra di Studi 1 e 2, i soggetti (N = 15 per studio) sono stati reclutati tramite volantini pubblicitari e manifesti sulla University of Washington, Seattle, WA campus. Potenzialmente soggetti interessati sono stati invitati a chiamare o e-mail per ulteriori informazioni sullo studio. I soggetti sono stati sottoposti a screening con un elenco di domande (per telefono) o un questionario (via e-mail) per determinare se fossero ammessi a partecipare. I soggetti sono stati esclusi se erano sotto i 18 anni, in cattive condizioni di salute, ha avuto ponti totali o parziali, ha avuto gli impianti, aveva fenilchetonuria, o prodotti xilitolo utilizzati regolarmente. uso xilitolo è stato determinato da un questionario cibo che è stato sviluppato e utilizzato per i nostri studi precedenti xilitolo e aggiornato per questi studi [2, 7]. Il questionario è stato somministrato cibo a soggetti potenziali durante il processo di screening. uso xilitolo regolare è stata definita come superiore a 3 volte al giorno o per più di 3 giorni. Questi parametri sono stati stabiliti perché nei nostri studi precedenti xilitolo [2, 7], questa frequenza era al di sotto della soglia giornaliera efficace. L'Institutional Review Board della Università di Washington ha approvato questi studi e il consenso informato scritto dei partecipanti è stato ottenuto.
Soggetti ammissibili è stata data una data e l'ora per la loro visita iniziale (prima) e ha chiesto di astenersi dal consumare qualsiasi prodotto xilitolo 24 ore prima della loro visita. I soggetti hanno ricevuto un elenco dei prodotti al fine di evitare prima che le loro visite di studio. Ai soggetti è stato anche chiesto di astenersi dal mangiare o bere (tranne l'acqua) 1 h prima della visita.
Procedure
procedure generali per
il (primo) visita e le successive visite iniziali, sono stati confermati i criteri di ammissibilità di cui sopra e un campione di saliva basale stimolata è stata raccolta. Soggetti masticato di paraffina per 1 minuto (ingestione dopo le 1 st 30 secondi, la saliva poi consentito di accumulare nel corso del 2 nd 30 secondi), sputare in provette coniche refrigerate pre-etichettati 50 ml, e scartato la paraffina. I tubi sono stati posti su ghiaccio immediatamente dopo la raccolta. I soggetti sono stati ammessi a continuare nello studio se ci hanno fornito almeno 1 ml di saliva stimolata al basale di questa prima visita. Dopo che il campione di riferimento è stata presa, i soggetti hanno ricevuto 1 di 3 prodotti contenenti xilitolo. Tutti i soggetti sono stati testati con ciascuno dei 3 prodotti per un periodo di 3 settimane (Vedere Studi 1 e 2). C'era un washout di 7 giorni tra ogni prodotto. L'ordine dei prodotti xilitolo è stato determinato in modo casuale per ogni soggetto a questa visita utilizzando un generatore di numeri casuali.
Studio 1
Per Studio 1, dopo che i soggetti hanno fornito un campione di saliva di base (sopra descritto), hanno consumato 1 di 3 prodotti xilitolo (xilitolo pellet gomma (2,56 g /visita in 3 pezzi; Fennobon Oy, Karkkila, Finlandia), xilitolo orsetti gommosi (2,6 g /visita in 2 pezzi, Santa Cruz nutrizionale precedentemente Harmony Foods Corp, CA, USA), e xilitolo bastone gomma (3,0 g /visita in 2 pezzi; Koolerz, Hershey Foods, PA, USA) e ha dato campioni di saliva più volte nel corso di un periodo di 15 a 20 minuti campioni di saliva sono stati prelevati durante stimolato (mentre si utilizza il prodotto xilitolo) e stimolata (. non utilizzare il prodotto) punti di tempo. ad ogni punto di tempo di campionamento, da un minimo di 0,5 ml di saliva sono stati raccolti.
Per la xilitolo pellet o bastone xilitolo visite gomma, materie masticato la gomma e inghiottiti normalmente, a 1 minuto che ingerite per l'ultima volta, il capo inclinato leggermente in avanti, e sputò la saliva accumulata nel tubo da 50 ml di pre-etichettati conica. Questo è stato ripetuto per intervalli di tempo di campionamento (2, 3, 4, e 5 minuti). Dopo il punto di tempo di 5 minuti, la gomma è stata scartata e soggetti sedette in silenzio con le loro teste appese, rendendo mascella minima e movimenti facciali per consentire la saliva di accumulare. La saliva non stimolata è stato raccolto a 7, 9, 11, 13, e 15 minuti dopo la linea di base.
Per la visita gommosa orso, i soggetti masticato e ingoiato orsetti gommosi (2 Bears) uno alla volta. Subito dopo aver consumato il primo orso gommoso, i soggetti ingerite per l'ultima volta, inclinato leggermente in avanti la testa, e sputavano la saliva accumulata nel tubo conico pre-etichettati. I soggetti hanno seguito la stessa procedura per consumare il secondo orso gommosa. Dopo il secondo orso gommoso, i soggetti seduti in silenzio con le loro teste appese, rendendo mascella minima e movimenti facciali per consentire la saliva di accumulare. La saliva non stimolata è stato raccolto a 4, 6, 8, 10, 12, 14, e 16 minuti dopo la linea di base.
Studio 2
Dopo soggetti forniti una paraffina basale stimolato campione di saliva nello stesso modo come in Studio 1, hanno consumato 1 di 3 prodotti xilitolo (xilitolo pellet gomma (stessa dose dello studio 1), orsi xilitolo gommosi (stessa dose come Studio 1), e il 33% di sciroppo di xilitolo (2.67 g /visita in una singola 8 ml monodose applicatore; formula disponibile su richiesta) e ha dato campioni di saliva più volte nel corso di un periodo di 15-20 minuti. Come nello Studio 1 campioni di saliva sono stati raccolti con un minimo di 0,5 ml per campione.
fare riferimento a Studio 1 per le procedure per il pellet xilitolo gomma e muniti gommosa visite. Per la visita sciroppo, soggetti applicati circa la metà dello sciroppo dall'utilizzo singolo applicatore monodose in ogni lato della bocca tra i denti e la guancia. Essi swished sciroppo intorno ai loro denti con la lingua prima di deglutire . Subito dopo aver consumato lo sciroppo, i soggetti ingerite per l'ultima volta, inclinato leggermente in avanti la testa, e sputavano la saliva accumulata nel tubo conico pre-etichettati. I soggetti seduti in silenzio con le loro teste appese, rendendo mascella minima e movimenti facciali per consentire la saliva di accumulare. saliva non stimolata è stato raccolto a 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, e 18 minuti.
Per entrambi Studi 1 e 2, i campioni di saliva sono stati trasferiti dai tubi conici a provette da 1,5 ml Eppendorf e congelati a -20 ° C prima dell'analisi HPLC
. analisi HPLC
cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) è stato utilizzato per analizzare i campioni di saliva. campioni di saliva sono stati trattati come segue: 200 ml di campione di saliva è stato aggiunto a 50 ml di 1 M NaOH in uno sterile 1.7 ml Eppendorf. Per questo, 50 ml di mannitolo (sorgente) a 2 mg /ml è stato aggiunto ad ogni campione di agire come standard interno. I campioni sono stati in agitazione brevemente e poi pipettati in un altro tubo munito di un filtro da 0,45 micron PTFE e una fiala pulita autocampionatore. Questi campioni sono stati centrifugati per 1 min a 2000 rpm a temperatura ambiente; l'eluente è stato utilizzato per l'analisi HPLC di monosaccaridi su una colonna CarboMA1 [18 (Dionex Corp., Sunnyvale, CA)], ed usando le condizioni elencate di seguito.
Un autocampionatore ESA è stato utilizzato per iniettare 30 ml di campione durante la separazione correre; il tempo di funzionamento per ogni separazione era di 20 min. Isocratica separazione HPLC di zuccheri è stata effettuata utilizzando degassata 500 mM NaOH come eluente, utilizzando una velocità di flusso di 0,4 mL /min. Gli zuccheri sono stati rilevati da un rilevatore pulsata amperometrico con l'alta sensibilità Modello 5040 elettrodi d'oro (ESA II Coulochem HPLC elettrochimico). In tutti i casi, l'impostazione polso era +50, +700 e -800 mV per 500, 540 e 540 ms rispettivamente [19]. Tutti i dati di esecuzione è stato scaricato e analizzati utilizzando il software EZChrom, versione 2.0 (ESA, Chelmsford, MA). Tutti i dati di concentrazione salivare xilitolo sono stati espressi in mg /ml, ma potrebbero essere espressi nella Systeme Internazionale (SI) Unità (mmol /L) (ad esempio, 40 mg /ml = 0,26 mmol /L)
. Analisi dei dati
Tutti i dati sono stati importati in MS Excel e controllati. La concentrazione media (SD) xilitolo per ciascun punto di prelievo (Studi 1 e 2) è stato calcolato utilizzando SPSS v. 12.02 (SPSS, Chicago, IL). L'affidabilità è stata determinata calcolando la correlazione (Pearson momento product) tra la gengiva xilitolo masticare (pellet) e gli altri prodotti contenenti xilitolo. Per entrambi gli studi ravvicinamento delle area sotto la curva (AUC, μg.min /ml) per la determinazione della concentrazione media xilitolo nella saliva durante il periodo di campionamento totale è stato calcolato per ciascun prodotto utilizzando SAS /ETS PROC EXPAND (SAS, Cary, NC) e rispetto alla curva xilitolo gomme da masticare (pellet) per determinare la validità del metodo utilizzando PROC MIXED (SAS, Cary, NC). Risultati
Studio 1
Nello Studio 1, tutti e tre i prodotti xilitolo (gomma pellet , orsetti gommosi, e il bastone di gomma) hanno curve di tempo simili, con una maggiore concentrazione primo picco seguito da un picco di concentrazione secondo inferiore durante il periodo di campionamento (vedi figura 2). Tabella 1 mostra le concentrazioni medie xilitolo per ciascun prodotto xilitolo in punti di prelievo designati. Il primo picco medio è stato a 4 min (pellet gomma - 10,2 mg /ml; orsetti gommosi - 10,9 mg /ml; e bastone da masticare - 9,0 mg /ml). Il secondo picco medio era a 13 min (pellet gomma - 6,4 mg /ml; bastone gomma -5.2 mg /ml), ea 14 min (orsetti gommosi - 5,7 mg /ml). La temporizzazione del secondo picco tra le gengive xilitolo e gommosi può essere attribuito al protocollo di campionamento. Totale AUC per i due prodotti contenenti xilitolo non hanno mostrato differenze significative dalla gengiva pellet (pellet gomma - 51,3 μg.min /mL, orsetti gommosi - 59,6 μg.min /mL, e bastone gomma - 46,4 μg.min /mL; F (1, 28) = 0,16, p = 0,69). Il coefficiente di correlazione (r 2) tra le concentrazioni medie xilitolo in ogni punto di tempo è stato di 0,99 tra la gomma da masticare xilitolo pellet e orsetti gommosi xilitolo e 0,99 tra il pellet e bastone gomma. Figura 2 Studio 1: confronto delle concentrazioni salivari xilitolo (mg /ml) dopo l'utilizzo di prodotti contenenti xilitolo-(N = 15)
Tabella 1 Studio 1:. Concentrazione salivare xilitolo ((mg /ml) nel corso del tempo, media (SD )) dopo l'utilizzo di prodotti contenenti xilitolo-(N = 15)
Tempo
pellet gomma da masticare 3 pezzi × 0,85
Gummy bear 2 pezzi × 1,3 g
Stick gomma da masticare 2 pezzi × 1,5 g
Baseline
2.06 (0.74)
1.55 (0.53)
1.55 (0.39)
1 min
1.72 (0.86)
1 - 2.19 (1.11)
2 - 3.30 (1.58 )
2.06 (2.08)
2 min
3.54 (3.89)
2.24 (1.39)
2.96 ( 2.28)
3 min
2.07 (0.98)
--------
2.16 (1.10)

4 min
10.22 (3.65)
10.87 (2.18)
8.97 (3.03)
5 min
3.59 (2.88)

3.14 (1.30)
6 min
-------- ----
2.87 (1.56)
------------
7 min
1,75 (.47)
---------
1.60 (0.55)
8 min
---- --------
1.42 (0.49)
------------
9 min

2.10 (1.07)
---------
2.15 (0.99)
10 min sull'oggetto - -----------
1.90 (0.62)
------------
11 min
2.62 (2.25)
------------
2.43 (0.62)
12 min
------------
2.33 (0.96)
------------


13 min
6.37 (4.41)
------------
5,18 (2,60)

14 min
------------
5.66 (2.86)
----------- -
15 min
2.45 (1.65)
------------
2.03 (0.67)
16 min
------------
2,27 (0,76)
----- -------
Studio 2
Nello Studio 2, i tre prodotti xilitolo (gomma pellet, orsetti gommosi, e sciroppo) aveva curve di tempo simili con una maggiore concentrazione secondo picco opposto a quella di Studio 1 (vedi figura 3). La tabella 2 mostra le concentrazioni xilitolo medi di punti di prelievo designati. Il primo picco medio era a 4 min (pellet gum - 8.2 mg /mL; gommosi - 7,0 mg /mL) e 6-8 min per lo sciroppo Città - 6.0 al 6.6 mg /mL. Il secondo picco medio è stato di tra 13-16 min (13 min per la pallina da masticare - 10.1 mg /ml; 14 min per orsetti gommosi - 9,0 mg /ml e 16 min per lo sciroppo -8.3 mg /ml). Come nello Studio 1, il differenziale di temporizzazione del secondo picco tra i prodotti xilitolo può essere attribuito alle differenti protocolli di campionamento. AUC totale per i due prodotti contenenti xilitolo non hanno mostrato differenze significative dalla gengiva pellet (pellet gomma - 63,0 μg.min /mL, orsetti gommosi - 55,9 μg.min /mL, e sciroppo - 59.0 μg.min /mL; F ( 1, 26) = 0.05, p = 0,83). Il coefficiente di correlazione (r 2) tra le concentrazioni medie xilitolo in ogni punto di tempo è stato di 0,99 tra la gomma da masticare xilitolo pellet e orsetti gommosi ed è stato 0,96 tra la gengiva pellet masticazione e lo sciroppo. Figura 3 Studio 2: confronto delle concentrazioni salivari xilitolo (mg /ml) dopo l'utilizzo di prodotti contenenti xilitolo-(N = 15)
Tabella 2 Studio 2:. Concentrazione salivare xilitolo ((mg /ml) nel corso del tempo, media (SD )) dopo l'utilizzo di prodotti contenenti xilitolo-(N = 15)
Tempo
pellet gomma da masticare 3 pezzi × 0,85
Gummy bear 2 pezzi × 1,3 g
Sciroppo 2,67 g
Baseline
2.02 (0.60)
2.19 (0.64)
2.01 (0.43)
1 min
1,61 (0,26)
1 - 1,66 (0,48)
2 - 3.27 (0.96)

1.98 (0.73)
2 min
2.87 (1.35)
1.87 (0.60)
3.45 (1.76)

3 min
1.83 (1.00)
--------
------------
4 min
8.20 (4.20)
7,03 (4,00)
2.50 (1.47)
5 min
5,93 (3,91)

------------
6 min

------------
4.96 (1.49)
6.01 (3.62)
7 min

1,73 (0,33)
---------
------------
8 min
------------
1,66 (0,64)
6.61 (3.71)
9 min
2.54 (1.01)
---------
------------

10 min
------------
2.15 (0.56)
1.98 (0.68)
11 min
3.69 (1.81)
------------ ------------


12 min
------------
3.33 (0.83)
2.06 (0.37)

13 min
10.12 (3.15)
------------
-------- ----
14 min
------------
8.97 (3.28)
3.51 (1.21)
15 min
2.40 (1.05)
------------ sull'oggetto - ----------
16 min
------------
2,40 (0,97)
8.29 (3.54)
18 min
------------
------ ------
2.45 (0.95)
Discussione
I prodotti contenenti xilitolo utilizzati in questi studi erano o disponibile in commercio (pellet gomma, bastone gomma) o fabbricati per un altro dei nostri studi (orsetti gommosi, sciroppo). I soggetti sono stati istruiti a consumare i prodotti che normalmente sarebbero stati consumati. Per esempio, tutti i pezzi gomma sono stati masticati insieme e gommosi sono stati consumati una alla volta.
Entrambi gli studi hanno mostrato che tutti i livelli salivari prodotti xilitolo xilitolo aumentato con il consumo del prodotto xilitolo. La quantità xilitolo (cioè dose) consumata per ciascun prodotto xilitolo contenenti era la stessa dose unitaria precedentemente determinata nei nostri studi xilitolo ridurre S. mutans
livello quando consumati da 3 a 5 volte al giorno [7].
Entrambi gli studi hanno dimostrato che gli altri prodotti contenenti xilitolo sono stati simili a xilitolo contenenti pellet gomma da masticare ( "gold standard") nel loro livello e tempo corso delle concentrazioni di xilitolo salivari. Ciò suggerisce che questo metodo è un metodo valido per misurare la concentrazione xilitolo nella saliva. Inoltre, gli altri prodotti contenenti xilitolo "(orsetti gommosi, xilitolo bastone di gomma, e sciroppo di xilitolo) le concentrazioni medie di xilitolo salivari attraverso il tempo sono stati altamente correlati allo xilitolo salivare xilitolo pellet da masticare di gomma. Ciò suggerisce che questo metodo è affidabile
Studi 1 e 2 concorda con gli studi Lif Holgerson e Tapiainen [10, 11]:. Concentrazioni xilitolo salivari erano elevati per un breve periodo di tempo (meno di 15 minuti) e poi successivamente rifiutati . È interessante notare che i livelli salivari all'interno dei nostri studi non sono aumentate in modo lineare, ma in un modo bimodale. Entrambi gli studi Lif Holgerson e Tapiainen [10, 11] non hanno mostrato un secondo picco di concentrazione. Come accennato in precedenza, non è chiaro dalla descrizione degli studi Lif Holgerson e Tapiainen dei protocolli specifici seguiti per il campionamento saliva. Il nostro protocollo di studio è stata orientata verso un approccio "vita reale"; i soggetti sono stati istruiti a consumare i prodotti xilitolo come farebbero normalmente. È possibile che i due picchi dimostrato negli studi attuali erano il risultato del protocollo; vale a dire, il campionamento sia stimolata (durante il consumo xilitolo) e livelli salivari non stimolate dal momento che tutti i prodotti campionati dimostrato questo. Nello studio Lif Holgerson (Esperimento A), saliva è stato raccolto dopo il consumo del prodotto xilitolo (saliva non stimolata) che corrisponde con la nostra periodo di campionamento non stimolato, e dal pavimento della bocca con una pipetta. Questo può essere un artefatto del sistema di raccolta salivare e solleva domande circa la validità di questo approccio. Inoltre, nello studio Tapiainen un solo campione per ogni bambino è stata presa mentre nel corso di studio campioni ripetuti sono stati prelevati per ogni soggetto. Infine, i limiti di rilevabilità tra gli studi in corso e citati erano diverse. L'analisi HPLC ha un livello molto inferiore di rilevamento di xilitolo (0,2 ng /mL) rispetto al saggio enzimatico (0,2 mg /L) utilizzato negli studi precedenti [10, 11].
Interessante Studio 2 aveva salivare xilitolo livelli leggermente inferiori studio 1 e ha avuto il suo più alto picco di concentrazione media alla seconda metà del periodo di campionamento rispetto allo Studio 1. Non è chiaro il motivo per cui Studio 2 risultati hanno mostrato la distribuzione bimodale inversa dei livelli salivari xilitolo. Questa variazione può essere stato a causa delle differenze intrinseche di un altro gruppo di soggetti utilizzati nello Studio 2.
Conclusione
Questa metodologia può essere utile per l'esame della concentrazione salivare e naturalmente il tempo di xilitolo in altri prodotti contenenti xilitolo e potrebbe servire come un surrogato per studi più lunghi e più costosi che coinvolgono valutazione del livello batterica o studi clinici che coinvolgono un gran numero di soggetti umani. Per entrambi gli studi, rispetto alla gomma xilitolo pellet, gli altri prodotti contenenti xilitolo testate hanno curve di tempo simili e significano picchi di concentrazione xilitolo. Questo suggerisce che gli effetti degli altri prodotti xilitolo 'sui livelli di batteri e carie dovrebbero essere simili agli effetti dimostrati con l'utilizzo xilitolo pellet gomma
. Dichiarazioni
Ringraziamenti
Vorremmo ringraziare le seguenti aziende per fornire al prodotti usati; zucchero xilitolo (Danisco, New York) e porta xilitolo gommosi (Santa Cruz Nutritionals precedentemente Harmony Foods Corp, Santa Cruz, CA). Inoltre, vorremmo ringraziare il Dott Eva Soderling per condividere la sua esperienza nello sviluppo dei protocolli di studio e l'Università di Washington, School of Nursing, Biobehavioral Nursing Research Lab (concessione supportato dal NIH, NINR2 P30 NR 04001). Supportato da NIDCR-NIH U54 DE14254; Head Start, HRSA 90YD0188 /03; e MCHB, HRSA R40MC03622-03.
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L'autore (s) dichiarano di non avere interessi in gioco.
autori contributi
CAR ha partecipato alla progettazione e l'analisi dello studio e ha redatto il manoscritto. PM ha concepito dello studio, ha partecipato alla progettazione e analisi, e commentato il manoscritto. KAL partecipato alla progettazione e l'analisi dello studio e commentato il manoscritto. MR, GM, MKH, MCR ha effettuato lo studio, e ET ha condotto il test HPLC, e commentato il manoscritto. LZ assistito nell'analisi dei dati. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.