Abstract
sfondo
Recentemente, la letteratura dentale si è concentrata principalmente sulla colonizzazione microbica dei bambini sani a termine e le loro madri o custodi. Tuttavia, l'acquisizione microbica orale neonati prematuri non è stato adeguatamente indagato, e la correlazione tra la nascita pre-termine e la presenza di agenti patogeni cariogeni e parodontali non è stata determinata. Lo scopo di questo studio era di identificare la presenza e la quantità di agenti patogeni cariogeni e parodontali rappresentativi nelle cavità orali di 12 mesi di età i bambini e confrontare il verificarsi di questi microbi tra una coorte di neonati pre-termine con bassissimi birthweights e un coorte di controllo composto da neonati a termine.
Metodi
La coorte di ricerca era composto da 69 di un anno di età i bambini, di cui 24 sono nati prematuramente con bassissime birthweights e 45 dei quali sono stati riportati a termine. Le informazioni relative età gestazionale dei neonati, modalità di consegna, stato generale di salute, peso alla nascita e l'uso di antibiotici sono stati ottenuti da registri ospedalieri e attraverso interviste orali. A 12 mesi di età, entrambi i gruppi di bambini sono stati esaminati, e campioni di saliva non stimolate dal dorso della lingua e campioni di placca dentale sono stati raccolti. I microrganismi (Streptococcus mutans, Lactobacillus spp., Actinomyces spp., Actinomycetemcomitans Aggregatibacter, Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsizia, Treponema denticola, Micros Peptostreptococcus, Prevotella intermedia, Fusobacterium nucleatum
) sono stati identificati e le loro quantità sono stati valutati utilizzando una a base di PCR metodo. Il chi-quadrato e test fattoriali di Fisher sono stati utilizzati per le valutazioni statistiche.
Risultati
I bambini avevano un alta prevalenza di microbi cariogeni e di Fusosbacterium nucleatum
e Aggregatibacter actinomycetemcomitans
. microbi cariogeni sono stati rilevati nel 91,7% dei neonati molto basse peso alla nascita e in tutti i neonati a termine. patogeni parodontali erano presenti nel 83% dei neonati pre-termine e nel 96% dei neonati a termine. Una differenza significativa è stata trovata tra le coorti in termini di presenza di S. mutans
. La maggior parte dei neonati molto basso peso alla nascita aveva valori negativi di questo microbo, mentre i neonati a termine avevano valori positivi.
Conclusioni
Questo studio conferma la trasmissione tempestiva dei patogeni cariogeni e parodontali rappresentativi alla cavità orale di one infanti vecchio anno e una maggiore prevalenza di S. mutans
in neonati a termine che nei neonati prematuri.
Parole
microbi cariogeni carie dentale patogeni parodontali neonati pre-termine S. mutans elettronico materiale supplementare
La versione online di questo articolo (doi:. 10 1186 /1472-6831-14-109) contiene materiale supplementare, che è disponibile per gli utenti autorizzati
Sfondo
nascita pre-termine e basso peso alla nascita sono. principali cause di mortalità e morbilità nei neonati in tutto il mondo. Secondo la definizione dell'Organizzazione Mondiale della Sanità [1], un neonato pre-termine è definito come essere nati prima settimana gestazionale 37 o avere basso peso alla nascita. Un basso peso alla nascita è definito come peso inferiore a 2500 g, indipendentemente dall'età gestazionale. neonati basso peso alla nascita sono ulteriormente suddivisi in neonati molto basso peso alla nascita (VLBW), con peso alla nascita & lt; 1500 g, e estremamente basso peso alla nascita i neonati, con peso alla nascita & lt; 1000 g. conti di consegna pre-termine per circa il 6% di tutti i nati vivi nei paesi sviluppati dell'Europa occidentale [2]. Prematuri neonati sottopeso hanno un periodo prenatale più breve e sono predisposti a varie complicazioni perinatali e neonatali e problemi di sviluppo che possono influenzare la loro crescita e il progresso generale durante l'infanzia e per tutta l'infanzia. Basso peso alla nascita è strettamente correlata alla mortalità perinatale infantile e ad un aumento del rischio di morbilità precoce e tardiva.
Parto prematuro può essere collegato alla comparsa di malattie parodontali nelle donne in gravidanza. Si ritiene che gli agenti patogeni parodontali o mediatori infiammatori inducono raggiungono il sistema riproduttivo materno attraverso il flusso sanguigno e suscitano una cascata infiammatoria che dà luogo a parto prematuro [3]. Secondo alcuni autori [4, 5], alcuni batteri Gram-negativi orali creano un effetto cumulativo che è sufficiente a far scattare la consegna anticipata, che rappresenta l'ultimo passo per produrre un lavoro a basso peso alla nascita. Negli studi di Ercan et al. [5] e Gonzales-Marin et al. [6], il microbo anaerobica F. nucleatum
è stato isolato dal liquido amniotico, la placenta e le membrane chorioamnionic di donne che forniscono prematuramente. Contrariamente al lavoro di Heimonen et al. [7], un legame causale tra lo stato di salute orale di una donna e la sua esperienza con le nascite pre-termine o a termine non può essere assunto.
Recentemente, la letteratura dentale si è concentrata sulla colonizzazione microbica dei bambini sani a termine e le loro madri o altri custodi. Autori [8-10] hanno sottolineato colonizzazione microbica e la trasmissione di microbi cariogeni nella cavità orale, come pure il ruolo di S. mutans
nello sviluppo di carie infanzia; tuttavia, l'acquisizione microbica orale da parte dei neonati prematuri con peso alla nascita molto basso non è stato adeguatamente indagato.
Abbiamo ipotizzato che i bambini nati pre-termine avrà diversi livelli di colonizzazione cavità orale con patogeni cariogeni e parodontali rispetto ai neonati a termine. Abbiamo previsto che la colonizzazione microbica in precedenza nei neonati pre-termine può essere dovuto a differenze nei loro sistema immunitario. Lo scopo di questo studio è stato quello di determinare la presenza e valori dei principali agenti patogeni noti cariogeni e parodontali nelle cavità orali di un anno di età i bambini senza carie, e per confrontare i risultati a bassissime neonati alla nascita pre-termine con pieno neonati a termine.
Metodi
Questo studio caso-controllo è una parte del progetto di ricerca a lungo termine sostenuta dal Ministero della Salute della Repubblica Ceca eseguito presso il Dipartimento di Odontoiatria e Neonatologia Facoltà di Medicina a Pilsen, Charles University di Praga, Repubblica Ceca. Abbiamo reclutato tutti di un anno di età i bambini consecutivamente di cui da parte del Dipartimento di Neonatologia per l'esame durante il periodo di studio tra il 1 gennaio 2013 e il 31 dicembre 2013. I dati personali, tra cui l'età gestazionale, modalità di consegna, lo stato di salute generale, l'uso di antibiotici e la storia medica sono stati ottenuti attraverso interviste orali e dai registri ospedalieri. L'età gestazionale è stata stimata dalla data riportata di ultima mestruazione della madre. I bambini sono stati divisi in due gruppi: gruppo A neonati compreso consegnati pre-termine con molto basso peso alla nascita, e il gruppo B costituiti neonati a termine. La presenza degli incisivi decidui nella cavità orale era il criterio di inclusione per tutti i neonati, oltre alla età gestazionale & lt; 37 settimane e peso alla nascita & lt; 1500 g per il gruppo A e l'età gestazionale & gt; 37 settimane e peso alla nascita & gt; 2500 g per il gruppo B. I criteri di inclusione comprendeva anche stato socio-economico mezzo di classe per entrambi i gruppi. I bambini nei gruppi A e B incontro una delle seguenti condizioni sono stati esclusi dallo studio: 1) terapia antibiotica contemporanea; 2) trattamento antibiotico nei 6 mesi precedenti l'esame clinico e microbiologico; 3) malattia sistemica o deficienza immunologica nei neonati a termine; e 4) qualsiasi tipo di farmaco. Dei 87 esaminati di un anno di età i bambini caucasici, 69 sono stati selezionati sulla base dei criteri di inclusione ed esclusione. Una coorte di ricerca definitivo era composto da 69 di un anno di età i bambini caucasici oralmente sani, 24 dei quali (gruppo caso A) sono nati prematuramente con bassissime birthweights e 45 dei quali (controllo di gruppo B) sono stati nati a termine. Le caratteristiche dei gruppi infantili sono riportati in Tabella 1. L'età gestazionale media e peso alla nascita dei neonati nel gruppo A sono stati 29,7 settimane e 1154,9 g, rispettivamente. Gruppo A è stato caratterizzato da polimorbidità (Tabella 2). I bambini del gruppo B sono stati soggetti sani senza una storia di malattia generale grave con una età gestazionale media di 39,8 settimane e peso alla nascita di 3254,7 g. Durante il periodo neonatale, tutti i neonati prematuri hanno ricevuto un trattamento antibiotico costituito da ampicillina per via endovenosa e gentamicina per 5-7 days.Table 1 Caratteristiche dei gruppi di ricerca
Gruppo
media peso alla nascita (g)
SD
media età gestazionale (settimane)
SD
modalità di consegna
Vaginale
taglio cesareo
Gruppo A
1.154,9
234,08
29,7
2,7
6 (25%)
18 (75%)
Gruppo B
3.254,7
392,7
39,8
1.0
33 (73,3%)
12 (26,7%)
Tabella 2 Le principali malattie dei neonati pre-termine nel periodo neonatale
Disease
numero di neonati prematuri affetti
%
distress respiratorio syndrome
23
95.8
Hyperbilirubinemia
18
75.0
Anemia
16
66.6
Patent dotto arterioso
8
33,3
Adnate infezione
6
25,0
enterocolite necrotizzante
5
20,8
perinatale asfissia
4
16,6
displasia broncopolmonare
4
16,6
congenita ernia ombelicale
4
16,6
apoplessia polmonare
3
12,5
Osteopathia
3
12,5
cardiopatia congenita
2
8.3
Posthemorrhagic idrocefalo
1
4.2
leucomalacia periventricolare
1
4.2
intraventricolare emorragia
1
4.2
a 12 mesi di età postnatale, i neonati sono stati esaminati utilizzando uno specchio dentale sterile e luce artificiale, prima della quale non avevano ricevuto cibo o bevande per 30 minuti o avevano i loro denti spazzolato. Un esaminatore addestrati condotto tutti gli esami orali clinici e raccolto i campioni di saliva. Per ogni bambino, un campione di saliva non stimolata è stato raccolto dal dorso della lingua e dalle superfici labiali degli incisivi decidui superiori con un tampone di cotone sterile. Ogni tampone è stato messo in una provetta sterile e immediatamente inviato al laboratorio (s.r.o. Proteiforme, Repubblica Ceca). In laboratorio, la regione genomica target contenente più parti molto variabili è stato amplificato e all'etichetta reazione a catena della polimerasi (PCR) con una miscela di primer universali. Il prodotto è stato denaturato poi ibridato ad un DNA - piattaforma macroarray con sonde specifiche immobilizzati applicati nei duplicati. Dopo alta - rigore lavaggio dei non - sonde ibridate, le macroarrays sono stati valutati in modo digitale. Questo test (Stoma Gene ™, s.r.o. Protean, Ceske Budejovice, Repubblica Ceca) utilizza tre regioni genomiche variabili indipendenti per la rilevazione di ogni agente patogeno e quindi fornisce risultati molto affidabili. In questo modo, sono stati individuati tre specie di batteri cariogeni e sette specie parodontali. Lo stoma - test di Gene ™ è in grado di determinare la presenza di S. mutans
(Sm), Lactobacillus
spp. (LSP), Actinomyces
spp. (Asp), Aggregatibacter actinomycetemcomitans
(Aa), P. gingivalis
(Pg), Tannerella forsizia
(Tf), T. denticola
(Td), Peptostreptococcus micros
(Pm) , Prevotella intermedia
(Pi), e F. nucleatum
(Fn) e valutare le loro quantità come segue: 1. - Non rilevato (con & lt; 10
3 unità formanti colonie (CFU))
2. + Debolmente positivo (con 10 3-10 4 CFU)
3. ++ Medio positivo (con CFU 10 4-10 5 CFU)
4. +++ Fortemente positivo (con & gt; 10 5 CFU).
I dati sono stati analizzati statisticamente utilizzando il software Statgraphics distribuito da Stat Point Technologies, Inc. di Warrenton, Virginia, Stati Uniti d'America. Il test del chi-quadrato e, quando solo pochi casi sono stati valutati in alcune categorie, prova fattoriale di Fisher è stato utilizzato per le analisi, con p & lt; 0.05 considerato statisticamente significativo. I dati sui microbi rilevati utilizzati per il confronto statistico tra i neonati prematuri ea termine sono stati ridotti a solo due alternative - negativo (non rilevato) e positivo (rilevato, a qualsiasi livello). Abbiamo anche valutato i livelli dei microbi rilevati nei due gruppi di bambini. Per questa analisi, una scala di grandezze è stato utilizzato: non rilevato, debolmente positivo, medio positivo e fortemente positivo
Considerazioni etiche
approvazione etica per lo studio è stato ottenuto presso la Facoltà Comitato Etico di Ricerca di Medicina a Pilsen, Charles University. a Praga. Lo studio è stato condotto in conformità con la Dichiarazione di Helsinki del 1975, come modificato nel 1983. Tutti i bambini sono stati reclutati da parte del Dipartimento di Neonatologia dell'Ospedale Facoltà a Pilsen, Repubblica Ceca. Prima lo studio, i tutori legali di tutti i bambini hanno fornito un consenso informato per i loro figli a partecipare allo studio.
Risultati
I gruppi esaminati di neonati avevano un'alta prevalenza di microbi cariogeni (S. mutans
, Lactobacillus specie
e specie Actinomyces
) e di F. nucleatum
e Aggregatibacter actinomycetemcomitans
. Altri agenti patogeni parodontali sono stati rilevati in un piccolo numero di casi, e T. denticola
non è stata rilevata (Figura 1). I risultati relativi alla particolare monitoraggio dei microbi in entrambi i gruppi di bambini sono presentati nella Tabella 3, dove sono descritti la frequenza assoluta dei singoli casi, nonché le loro percentuali nei due sottogruppi. Figura 1 Prevalenza di microbi cariogeni e parodontali.
Tabella 3 prevalenza di batteri cariogeni e parodontali in 12 mesi di età i bambini
Gruppo A
Gruppo B
Σ
P - Valore
batteri cariogeni
Sm
1 (4,2%)
45 (100%)
46 (66,7%)
& lt; 0.05
Lsp
22 (91,7%)
44 (97,8%)
66 (98,7%)
NS
Asp
18 (75%)
39 (86,7%)
57 (83%)
NS
batteri parodontali
Aa
20 (83,3%)
43 (95,5%)
63 (91%)
NS
Pg
0 (0%)
1 (2%)
1 (1%)
NS
Tf
1 (4%)
2 (4%)
3 (4%)
NS
Td
0 (0%)
0 (0%)
0 (0%)
Pm
1 (4%)
1 (2%)
2 (3% )
NS
Pi
0 (0%)
1 (2%)
1 (1% )
NS
Fn
14 (58,3%)
24 (53,3%)
38 (55% )
NS
La comparsa di microbi cariogeni
Uno o più microbi cariogeni sono stati rilevati nel 91,7% dei neonati molto basse peso alla nascita e in tutti i neonati a termine. Il microbo più spesso identificato nel gruppo cariogeni era la specie Lactobacillus
, che è stato trovato nel 98,7% dei bambini, seguito da Actinomyces specie
(83% dei neonati) e S. mutans
(66,7 % dei bambini). zona S. mutans
nel gruppo a, solo 1 delle 24 bambini (4,2%) è stato positivo per S. mutans
, mentre nel gruppo B, tutti i 45 bambini (100% ) nutrito questo batterio. Questa differenza è risultata statisticamente significativa (Chi Quadrato test-p = 0,0001).
Specie Lactobacillus
Entrambi i gruppi di bambini hanno alti tassi di specie Lactobacillus
colonizzazione. specie Lactobacillus
erano i microbi cariogeni più spesso rilevati nel gruppo di neonati pre-termine. specie Lactobacillus
sono stati rilevati in 22 (91,7%) dei 24 bassissime neonati alla nascita e in 44 (97,8%) dei 45 neonati a termine. prova fattoriale di Fisher ha indicato una differenza non significativa (p = 0,276).
Actinomyces specie
valori positivi della specie Actinomyces
sono stati rilevati in 18 (75%) dei neonati pre-termine e in 39 (86,7 %) dei neonati a termine. Test fattoriale di Fisher è stato usato per la valutazione statistica (p = 0,318), ei risultati hanno indicato che l'incidenza di valori positivi di specie Actinomyces
nei neonati prematuri differisce da quella dei neonati a termine non poteva essere provato .
il verificarsi di patogeni parodontali
Uno o più agenti patogeni parodontali sono stati rilevati nel 83% dei pre-termine e il 96% dei neonati a termine. Aggregatibacter actinomycetemcomitans
era il patogeno più comunemente presenti parodontale trovato nelle cavità orali dei bambini arruolati nel nostro studio.
Aggregatibacter actinomycetemcomitans
Aggregatibacter actinomycetemcomitans
è stato rilevato nel 20 (83,3%) del pre- neonati a termine e 43 (95,5%) dei neonati a termine. Test fattoriale del Fisher (p = 0,173) ha indicato che le differenze tra i gruppi non erano significativamente differenti.
Fusobacterium nucleatum
Fusobacterium nucleatum
è stato trovato nella saliva del 55% dei bambini nel nostro studio. Differenze statisticamente significative tra i neonati pre-termine e le neonati a termine sono stati trovati per quanto riguarda la presenza di F. nucleatum
.
Porphyromonas gingivalis
, Tannerella forsizia
, micros Peptostreptococcus
e intermedia Prevotella
sono stati raramente in entrambi i gruppi di bambini. Le differenze tra i gruppi non erano statisticamente significative.
I valori dei microbi rilevati
I valori debolmente positivi di specie Lactobacillus
e specie Actinomyces
erano i valori più frequenti di microbi cariogeni nel gruppo A . Streptococcus mutans
è stato fortemente positivo in un neonato (4,2%) nel gruppo a, mentre era fortemente positivo nel 48,9% del gruppo B neonati. In entrambi i gruppi, le specie Lactobacillus
e specie Actinomyces
erano per lo più trovati per essere debolmente positivo (Tabella 4). Aggregatibacter actinomycetemcomitans
è stata trovata a un livello medio positivo nel 33,3% del gruppo A bambini e ad un livello debolmente positivo nel 42,2% del gruppo neonati B (Tabella 5). Fusobacterium nucleatum
era più frequentemente debolmente positivo in entrambi i groups.Table 4 valori dei microbi cariogeni
Sm
Lsp
Asp
rilevato (d)
positività
rilevato (d)
positività
rilevato (d)
positività
gruppo A (n = 24)
+
++
+++
+
++
+++
+
++
+++
nd
1
0
0
1
22
19
3
0
18
13
4
1
% (n)
4.2
0
0
4.2
91.7
79.2
12.5
0
75.0
54.2
16.7
4.1
% (nd)
100.0
0.0
0.0
100.0
100.0
86.3
13.6
0.0
100.0
72.2
22.2
5.6
Gruppo B (n = 45)
+
++
+++
+
++
+++
+
++
+++
nd
45
12
11
22
44
32
12
0
39
24
8
7
% (n)
100.0
26.7
24.4
48.9
97.8
71.1
26.7
0.0
86.7
53.3
17.8
15.5
% (nd)
100.0
26.7
24.4
48.9
100.0
100.0
72.7
27.3
100.0
61.5
20.5
17,9
Table 5 I valori dei microbi parodontali
