Abstract
sfondo
Lo scopo di questo studio era di confrontare la reazione del tessuto connettivo ratto di materiali di riempimento di due root-end: bianco Mineral Trioxide Aggregate ( WMTA) e Diaket.
Metodi
ciascuno dei materiali è stata posta in tubi di dentina e impiantato per via sottocutanea nella dorsale del tessuto connettivo di 21 ratti albini Wistar. biopsie dei tessuti sono stati raccolti 7, 30, e 60 giorni dopo la procedura di impianto. I campioni sono stati trattati e colorati con ematossilina ed eosina e esaminati al microscopio. Dopo aver determinato il numero di cellule infiammatorie nelle sezioni da ogni campione, i punteggi reazione infiammatoria sono stati definiti come segue: 0; nessuna o poche cellule infiammatorie (nessuna reazione), 1; meno di 25 celle (reazione lieve), 2; Da 25 a 125 cellule, (reazione moderata), e 3; 125 o più celle (grave reazione). L'analisi statistica è stata effettuata utilizzando il test di Kruskal-Wallis e Mann-Whitney.
Risultati
Ci sono state differenze statisticamente significative nel numero di cellule infiammatorie mediana durante i tre periodi di prova, con la più grave grado di infiammazione osservata a quello periodo di settimane di. Pochi casi di necrosi sono stati osservati con WMTA. Diaket esposto la più grave grado di infiammazione e la necrosi. Dopo 30 giorni, entrambi i materiali hanno provocato reazione infiammatoria moderata. Il periodo di otto settimane ha mostrato il grado severo minimo di infiammazione in tutti i gruppi.
Conclusioni
Si è concluso che WMTA esibisce una risposta dei tessuti più favorevole rispetto a Diaket che ha indotto reazione infiammatoria più grave rispetto WMTA ed il controllo.
materiale elettronico supplementare
La versione online di questo articolo (doi:. 10 1186 /1472-6831-11-17) contiene materiale supplementare, che è disponibile per gli utenti autorizzati
Sfondo
a. procedura chirurgica periapicale di solito comporta la resezione radice-end, la preparazione e la chiusura, utilizzando un materiale di riempimento radice-end. Il successo della chirurgia può dipendere dalla capacità di tenuta del materiale di riempimento radice-end per evitare l'ingresso di batteri o di loro derivati, e anche sulla sua capacità di fornire un ambiente favorevole per la rigenerazione e la guarigione dei tessuti periradicolari [1, 2 ].
minerale triossido di aggregato (MTA) è stato sviluppato come un materiale di riempimento radice-end a Loma Linda University, California, Stati Uniti d'America [1]. I principali composti in questo materiale sono silicato tricalcico, alluminato tricalcico, ossido tricalcico e ossido silicato [2]. In vivo ed in vitro
studi hanno sostenuto l'uso potenziale di questo materiale come materiale di riempimento radice-end [3-5]. indagini precedenti hanno anche dimostrato la capacità di MTA incoraggiare tessuto duro deposizione [3, 6, 7], e la sua buona capacità di tenuta rispetto ad altri materiali [3, 8-10]. Inoltre, MTA è risultato essere ben tollerato e biocompatibile [11-17], e ha rivelato una risposta più favorevole dei tessuti periapicali confronto con amalgama, IRM, e Super EBA [4, 5, 18]
. Diaket è un chelato di calcio rinforzata con resina di polivinile [19]. Inizialmente è stato formulato come sigillante canalare quando miscelato in una polvere rapporto liquido di 1: 1. Tetsch, nel 1986, prima documentato l'uso di Diaket come materiale di riempimento radice-end quando mescolato ad una consistenza più spessa [20]. Diaket dimostrato proprietà accettabili [21-23]. Esso ha dimostrato una tenuta superiore rispetto all'amalgama [23], un potenziale di guarigione favorevole nei cani [22], e una migliore risposta di guarigione rispetto alla guttaperca [24].
Sia Diaket e MTA sono stati trovati per promuovere la rigenerazione dei tessuti periradicolare . . Tuttavia, le proprietà di manipolazione di Diaket sono stati considerati superiori a quelli del MTA [21]
Lo scopo del presente studio è stato quello di confrontare la reazione del tessuto connettivo di ratto per i materiali di riempimento di due root-end: bianco Mineral Trioxide Aggregate (WMTA) e Diaket.
Metodi
Twenty un maschio, 5-6 mesi di età ratti Wistar albini del peso di 350 ± 50 g sono stati utilizzati. La cura degli animali è stata effettuata secondo il Comitato Istituzionale cura degli animali e Usa e del Consiglio canadese cura degli animali [25, 26]. Il protocollo è stato approvato dall'Università Giordano di Scienza e Tecnologia di Presidenza della ricerca, e la cura degli animali dell'Università e del Comitato Usa. I seguenti gruppi sono stati indagati:
Gruppo 1:. Gruppo di controllo (tubi vuoti dentina)
Gruppo 2: Bianco Mineral Trioxide Aggregate (Dentsply, Tulsa Dental, Tulsa, OK, USA): Gruppo 3:. Diaket , (3 M ESPE AG, Seefeld, Bayern, Germania).
tubi dentina sono stati preparati da umani radici dei denti dei singoli denti con radice in una lunghezza di 7 mm. I canali sono stati ingranditi utilizzando i file (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Svizzera) e frese Gates Glidden (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Svizzera) ProTaper ad uno spessore della parete esterna di 0,5-1 mm. Il forame apicale è stato ampliato in un diametro approssimativo di 2 mm. I tubi sono stati dentina abbondantemente irrigati con ipoclorito di sodio 3% e il 18% EDTA (etilendiammina-tetra-acetico), (Ultra Dent, USA), lavato con acqua distillata, quindi in autoclave. Per ogni animale, tre tubi sono stati utilizzati, due come vettori dei due materiali testati e un tubo vuoto come controllo.
WMTA è stato mescolato in base alle raccomandazioni del fabbricante. Diaket è stato mescolato ad una consistenza (polvere rapporto liquido di 2: 1) più spessa rispetto alle raccomandazioni del produttore, [21]. I materiali sono stati applicati nei tubi.
Gli animali sono stati anestetizzati con un regime terapeutico a base di atropina (0,02-0,05 mg /kg), ketamina cloridrato (40-87 mg /kg) e xilazina cloridrato (5-13 mg /kg). Le pelli dorsali degli animali sono stati rasati e disinfettati con una soluzione di iodio 5%. Due incisioni lunghe centimetri sono stati fatti nel retro di ogni animale, di almeno 2 cm di distanza l'uno dall'altro, utilizzando un no. 15 lama (Aesculap AG & Co. KG, Tutlingen, Germania) in un testa a coda orientamento. La pelle è stata riflessa e spazi sottocutanei sono stati creati per via smussa. I tubi della dentina sono stati immediatamente impiantati negli spazi. La pelle è stata chiusa con sutura di 3/0 di seta.
Le valutazioni sono state effettuate a 7, 30, e 60 giorni dopo l'impianto chirurgico. In ciascun periodo di valutazione, 7 animali sono stati sacrificati con una overdose di anestetico. La pelle dorsale è stata rasata e le provette sono state escisse con il tessuto connettivo circostante. I campioni escissi sono stati tenuti in formalina al 10% per 2 settimane. Dopo la lavorazione dei tessuti e l'inclusione, sezioni seriali di 6 micron di spessore sono stati preparati e colorate con ematossilina eosina. Le sezioni sono state esaminate e valutate utilizzando un microscopio ottico (Olympus, U-MDOB BX 40, Olympus ottica Co. LTD, Giappone) a × 40, 100 ×, e × 400 ingrandimenti. Per ogni materiale, la somma e la media di cellule infiammatorie (leucociti polimorfonucleati (PMN), plasmacellule, linfociti, macrofagi e cellule giganti) e fibroblasti sono stati determinati in dieci aree separate a × 400 ingrandimenti. L'osservatore è stato accecato alla fonte dei tessuti
reazioni nel tessuto sono stati segnati come:. 0, nessuno o poche cellule infiammatorie (nessuna reazione); 1, meno di 25 cellule (lieve reazione); 2, tra i 25 e 125 cellule (reazione moderata); e 3, 125 o più celle (reazione grave), [13, 27, 28]. Necrosi e /o suppurazione sono stati classificati come "sì" o "no".
I risultati sono stati analizzati statisticamente utilizzando il test di Kruskal-Wallis e Mann-Whitney per il confronto della gravità della infiammazione a intervalli e per i materiali. Risultati
controllo gruppo
in campioni ottenuti a 7 giorni, è stata osservata tessuto di granulazione vascolare (Figura 1.a) che è stato dominato da PMN, plasmacellule e linfociti, con poche cellule giganti e macrofagi. Infiammata tessuto di granulazione che era cresciuto nelle provette è stato anche osservato (Figura 1.B). A 30 giorni, miti infiltrati cellulari infiammatori, prevalentemente dominate da linfociti e sottili capsule fibrose che circondano i tubi, sono stati osservati (Figura 1.c). tessuto di granulazione Inflamed stato anche notato all'interno dei tubi, ma con meno infiltrato infiammatorio (Figura 1.d). Al giorno 60, a pochi infiltrati cellulari infiammatori sparsi sono stati osservati (Figura 1.e), accanto a un aumento dell'attività fibroblastica e una spessa capsula fibrosa. è stata rilevata alcuna necrosi. Figura 1 immagini istologiche di infiltrazione di cellule infiammatorie alla fine di tubi impiantati e ricrescita dei tessuti di granulazione all'interno dei tubi di controllo e gruppi MTA (ematossilina-eosina). (A) altamente vascolare, moderatamente infiammata tessuto di granulazione (G) all'estremità del tubo dentina (D) nel gruppo di controllo a 7 giorni; ingrandimento originale × 50. (b) Ingrowth di tessuto di granulazione infiammato (I) nel lume del tubo nel gruppo di controllo a 7 giorni. Spazio precedentemente occupato da fine tubo dentina è rappresentato da (S); ingrandimento originale × 100. (c) Un sottile capsula fibrosa (FC) circonda il tubo vuoto dentina (D) a 30 giorni; ingrandimento originale × 200 (d) Ingrowth di tessuto di granulazione infiammato (I) all'interno di un tubo vuoto dentina (D) a 30 giorni; ingrandimento originale × 200. (e) infiammazione Molto lieve osservato in alcuni casi del gruppo di controllo a 60 giorni, in cui linfociti (L) erano le cellule predominanti; ingrandimento originale × 400. (f) angiogenesi attivo con tessuto di granulazione infiammato nella zona a contatto con MTA a 7 giorni. Multinucleate cellule giganti con inghiottito MTA (GM); ingrandimento originale × 200. (g) Necrosi nella zona adiacente al materiale MTA (M) a 7 giorni; ingrandimento originale × 200 (h) reazione infiammatoria lieve in un campione di MTA a 30 giorni; ingrandimento originale × 400. (i) Suppurazione (SP) osservata nella zona adiacente al materiale MTA (M) al tubo a 30 giorni; ingrandimento originale × 50.
C'era una differenza statisticamente significativa nella somma di cellule infiammatorie tra i tre periodi di prova per il gruppo di controllo (valore di P & lt; 0,05). Il numero di cellule infiammatorie era significativamente più alta per il 7 giorni rispetto al gruppo di 30 giorni.
WMTA gruppo
in campioni ottenuti a 7 giorni, necrosi circondato da angiogenesi attivo e tessuto di granulazione moderatamente infiammata è stato osservato (Figura 1. h, g). L'infiltrato è stato predominante da PMN, linfociti, plasmacellule, macrofagi e cellule giganti. sono state osservate reazioni infiammatorie simili il giorno 30 che sono stati caratterizzati da necrosi e /o suppurazione, circondato da un infiltrato infiammatorio moderata (Figura 1.h, i). Aumento dell'attività fibroblastica e sono state rilevate anche cellule giganti scarse e macrofagi (Figura 2.a). L'infiammazione è stata mite il giorno 60, e dominata da linfociti, macrofagi e cellule giganti, con un aumento dell'attività fibroblastica. Inoltre, un materiale osteoide simile è stato osservato adiacente al WMTA il giorno 60 (figura 2.b) in un campione. Figura 2 istologica immagini di caratteristiche infiammatorie infiltrazione cellulare e tissutale reazione alla fine dei tubi impiantati in MTA e gruppi Diaket (ematossilina-eosina). (A) Pochi macrofagi e cellule giganti (G) osservate nel gruppo MTA a 30 giorni; ingrandimento originale × 400. (b) materiale osteoide-like (OS) osservata nella zona adiacente al MTA (M) a 60 giorni; ingrandimento originale × 100. (c) necrosi grave ed estesa liquefactive o suppurazione (N) nella zona adiacente al Diaket materiale (M) a 7 giorni; ingrandimento originale × 100. (d) cellule giganti (G) e macrofagi nel tessuto connettivo adiacente Diaket a 30 giorni; ingrandimento originale × 200. (e) lieve infiammazione osservata nella zona adiacente al Diaket (M) a 60 giorni; ingrandimento originale × 100 (f) Prevalenza di linfociti nel gruppo Diaket a 60 giorni; ingrandimento originale × 50.
Una differenza statisticamente significativa è stata trovata nella somma di cellule infiammatorie tra i tre periodi di prova per questo gruppo. La somma più elevata di cellule infiammatorie è stato registrato per il gruppo 7-giorno e il più basso per il gruppo 60 giorni. Tuttavia, differenze significative sono state trovate solo tra il gruppo di gruppo di 7 giorni e 60 giorni, e tra il gruppo di 30 giorni e il gruppo di 60 giorni.
Diaket gruppo
in sezioni ottenute a 7 giorni, vasta liquefactive necrosi circondato da tessuto di granulazione infiammato altamente vascolarizzato è stato rilevato (Figura 2.c). Le cellule infiammatorie predominanti erano PMN, plasmacellule e macrofagi. A 30 giorni dopo l'impianto, la reazione infiammatoria è diminuita con un incremento di cellule giganti e infiltrati macrofagi (Figura 2.d). Al giorno 60, l'infiammazione era da lieve a moderata (Figura 2.e), e dominata da linfociti e plasmacellule (Figura 2.f). Non è stata osservata necrosi. Aumento dell'attività fibroblastica è stato anche notato, ma non era così pronunciato come nel controllo e gruppi WMTA
state osservate differenze statisticamente significative tra la somma delle cellule infiammatorie tra i tre periodi di prova. (P & lt; 0,05). La differenza statisticamente significativa trovato era quello tra i periodi di 7 giorni e 60 giorni (P & lt; 0,05), con il periodo di 7 giorni esibendo il più alto valore medio per la somma di cellule infiammatorie, seguito dal 30 giorni . poi i periodi di 60 giorni
confronto tra le gruppi in 7 giorni
ci erano differenze statisticamente significative (kW = 7.78, P & lt; 0,05) nel numero di cellule infiammatorie tra i tre gruppi. Il punteggio di cellule infiammatorie mediana nel gruppo Diaket (punteggio mediano di 2) era significativamente più alta rispetto al WMTA (mediana punteggio di 1) e il gruppo di controllo (punteggio mediano di 1) gruppo (p & lt; 0,05). Necrosi è stata osservata in tutti i campioni del gruppo Diaket e in tre esemplari nel gruppo WMTA
30 giorni
Ci sono state differenze statisticamente significative. (KW = 6.84, p & lt; 0,05) nel numero di cellule infiammatorie tra i tre gruppi . Il punteggio di cellule infiammatorie mediana nel gruppo Diaket (punteggio mediano di 2) era significativamente più alta rispetto al gruppo di controllo (punteggio mediano di 1), (p & lt; 0,05). Nessun'altra state riscontrate differenze significative. Necrosi è stata osservata in un solo esemplare nel gruppo Diaket e un esemplare del gruppo WMTA
60 giorni
Ci sono state differenze statisticamente significative (kW = 6.43, p & lt; 0,05). Nel numero di cellule infiammatorie tra i tre gruppi . I punteggi di cellule infiammatorie nel gruppo Diaket (punteggio mediano di 1) erano significativamente più alti rispetto al WMTA (punteggio mediano di 0) e il gruppo di controllo (punteggio mediano di 0). Necrosi non è stato rilevato in un esemplare ottenuti 60 giorni dopo l'impianto
. Discussione
La risposta istologica di materiali endodontici impiantati nel tessuto connettivo sottocutaneo di ratti fornisce una fonte preliminari di informazioni sul loro biocompatibilità che è relativamente semplice e adatto il test di routine di materiali endodontici [29, 30]. I primi esperimenti sui test di impianto coinvolto inserimento diretto del materiale testato nei tessuti molli di animali da esperimento [31, 32]. Lo svantaggio di questo metodo è che un'area relativamente grande di materiale era in contatto con il tessuto e, quindi, la reazione immediata potrebbe essere grave. Pertanto, si raccomanda l'impiantazione del materiale di prova in un vettore [12, 13]. Quando confrontato con applicazione diretta del materiale, questo metodo aiuta a stabilizzare il materiale in posizione, e ottenere una interfaccia standardizzata materiale tessuto [13].
Alcuni studi precedenti utilizzate silicio [30], teflon [29, 31], e polietilene [13, 33]. In questo studio, i tubi della dentina sono stati utilizzati per l'impianto sottocutaneo in accordo con altri studi precedenti, per rendere l'inchiesta più clinicamente rilevante [12, 34]. Uno svantaggio dell'utilizzo radici umane compagnie è la difficoltà di standardizzazione delle dimensioni dei tubi. Inoltre, può verificarsi una reazione immunologica di proteine estranee [31]. Tuttavia, la reazione ai tubi della dentina vuoti era in accordo con precedenti relazioni che ha trovato che i tubi della dentina vuoti indotti lieve infiammazione e la formazione di capsule fibrose [12, 34]. I tubi della dentina vuoti sono stati utilizzati come controllo per escludere qualsiasi aumento del numero di cellule infiammatorie causate dalla reazione di dentina [7, 12].
I materiali studiati sono stati utilizzati nella disinserito per simulare la situazione clinica. WMTA è difficile da gestire, e questo è uno dei suoi svantaggi, in quanto tende a spalmare e contaminare l'area di lavoro. Pertanto, meticolosa attenzione è stata praticata durante il posizionamento dei WMTA nei tubi della dentina. Nella situazione clinica, WMTA deve essere gestito con attenzione per ridurre al minimo questo problema.
La reazione osservato nel gruppo di controllo era in accordo con precedenti relazioni [12-14]. C'è stata una significativa diminuzione continua in risposta infiammatoria accompagnata da un aumento dell'attività fibroblastica. Anche se PMN sono stati predominanti al 7 ° giorno, hanno esposto contano una media più bassa rispetto a Diaket e WMTA gruppi. Questo valore medio è diminuito in modo significativo a 30 e 60 giorni, il che indica che i tubi della dentina vuoti possono aver indotto una reazione infiammatoria iniziale. La risposta infiammatoria a 7 giorni può essere dovuto agli effetti tossici dei materiali impiantati, o al trauma prodotto durante il posizionamento dei tubi, mentre a 30 e 60 giorni, la risposta infiammatoria può essere attribuito all'effetto cumulativo della tossicità i materiali di prova.
La reazione tissutale a WMTA era paragonabile ai risultati di studi precedenti [12-14]. i risultati di sette giorni hanno mostrato una reazione da corpo estraneo che moderata e diminuita a 30 giorni e significativamente diminuito a 60 giorni, ed è stata accompagnata da un aumento marcato l'attività fibroblastica. Ciò indica un aumento nel processo di riparazione e tollerabilità dal tessuto connettivo. Inoltre, il materiale osteoide come osservato al giorno 60, è in qualche modo paragonabile a risultati precedenti che descrivono la formazione di calcificazioni distrofiche [13].
I principali composti presenti in MTA sono silicato tricalcico, alluminato tricalcico, ossido tricalcico e ossido silicato [ ,,,0],2]. Dopo la reazione con fluidi tissutali, ossido di calcio produce idrossido di calcio. L'idrossido di calcio sarà successivamente dissociato in Ca
+ e OH -. Gli ioni ossidrile diffuse aumentare il pH e promuovere alcalinizzazione nei tessuti adiacenti, che favorisce la guarigione [7]. Inoltre, la biocompatibilità di MTA stato anche attribuito alla sua propensione a rilasciare calcio, e la sua capacità di formare idrossiapatite [35].
Diaket provocato un grave reazione iniziale, ma entrambi di 30 e 60 giorni risultati hanno mostrato che la reazione infiammatoria diminuita ad una risposta lieve-moderata. Queste osservazioni sono simili ai risultati di una precedente inchiesta [31]. Inoltre, è stata rilevata una diminuzione significativa del valore medio della somma delle cellule infiammatorie al giorno 60, accompagnato da un minimo incremento dell'attività fibroblastica.
Questo può indicare che Diaket ha una tendenza a indurre più grave ed acuta infiammatoria iniziale reazione con estesa necrosi liquefactive e /o suppurazione di WMTA. A 30 giorni, i gruppi WMTA e Diaket dimostrato comparabili conta di cellule infiammatorie medi. La gravità reazione infiammatoria diminuito in modo significativo al giorno 60. Risultati simili sono stati ottenuti in uno studio animale precedente nonostante le differenze nelle metodologie seguite rispetto alle indagini in corso [21].
La risposta infiammatoria grave iniziale alla Diaket potrebbe essere stato causato da il possibile rilascio iniziale dei materiali costituenti, e quando c'è stata una diminuzione della quantità di tali sostanze rilasciabili, l'infiammazione diminuita in gravità e il materiale è stato più tollerato dai tessuti
. Conclusioni
in conclusione, il infiammatoria iniziale risposta causata da WMTA era più favorevole rispetto alla risposta causata da Diaket. Tuttavia, con il passare del tempo, c'è stata una riduzione marcata della gravità della risposta infiammatoria, e un aumento dell'attività fibroblastica in entrambi i materiali. Ulteriori esperimenti sono necessari per confermare queste osservazioni
Abbreviazioni
WMTA:.
Bianco Minerale triossido aggregato
EDTA:
etilendiammina-tetra acido acetico
PMN:
polimorfonucleati leucociti
dichiarazioni
Riconoscimenti e finanziamenti
la ricerca è stata finanziata dalla deanship ricerca presso Jordan Università della Scienza e della Tecnologia codice di autorizzazione 53/2006.
autori fascicoli presentati originali per
di seguito sono riportati i link ai degli autori fascicoli presentati originali per immagini. 'file originale per la figura 1 12903_2010_185_MOESM2_ESM.pdf Autori 12903_2010_185_MOESM1_ESM.pdf autori file originale per la figura 2 interessi in competizione
Gli autori dichiarano di non avere interessi in gioco.
contributi degli autori
AW partecipato allo sviluppo della metodologia della ricerca, l'assistenza nella preparazione dei campioni, la redazione del manoscritto e l'analisi statistica. AM eseguito il lavoro sperimentale, assistito nella stesura del manoscritto e nell'esame dei campioni. HH ha partecipato nello sviluppo della metodologia della ricerca, e ha preparato ed esaminato i campioni. Tutti gli autori hanno letto e approvato la
finale manoscritto
