Abstract
sfondo
alterazioni patologiche dei tessuti parodontali sono mediate dall'interazione tra microrganismi e la ospiterà risposta immunitaria-infiammatoria. L'iperglicemia può interferire con questo processo. Lo scopo di questo studio è stato quello di confrontare i livelli di 27 molecole infiammatorie nel fluido crevicolare (GCF) dei pazienti con diabete di tipo 2, con e senza parodontite cronica, e di soggetti parodontite cronica senza diabete. Una correlazione tra putativo emoglobina glicata (HbA1c) e livelli di molecole infiammatorie è stato anche indagato
Metodi
La popolazione dello studio comprendeva un totale di 108 individui, stratificati in:. 54 con diabete di tipo 2 e parodontite cronica (DM + CP), 30 con parodontite cronica (CP) e 24 con diabete di tipo 2 (DM). I partecipanti sono stati intervistati con l'ausilio di questionario strutturato. sono stati registrati parametri parodontali (placca dentale, sanguinamento al sondaggio e profondità della tasca parodontale). I livelli GCF delle 27 molecole infiammatorie sono stati misurati utilizzando multiplex immunologico micro-perline. Un emoglobina glicata (HbA1c) test è stato eseguito per i pazienti con diabete di boronato cromatografia di affinità.
Risultati
Dopo aggiustamento per i potenziali confondenti, il gruppo DM + CP avevano livelli più elevati di IL-8 e MIP-1β, e più basso livelli di TNF-α, iL-4, INF-γ, RANTES e iL-7 rispetto al gruppo CP. Inoltre, il gruppo DM + CP ha bassi livelli di IL-6, IL-7 e G-CSF rispetto al gruppo DM. Il gruppo DM aveva livelli elevati di IL-10, VEGF, e G-CSF rispetto al gruppo CP. I livelli di MIP-1α e FGF erano più bassi nei pazienti con diabete (indipendentemente dal loro status parodontale) che nei soggetti parodontite cronica senza diabete. I pazienti diabetici (DM + CP e DM) avevano più alto rapporto Th-2 /Th-1 rispetto al gruppo CP. HbA1c positivamente correlata con le citochine pro-infiammatorie (Pearson coefficiente di correlazione = 0,27, valore di P: 0,02)
Conclusione
diabete di tipo 2 e parodontite cronica può influenzare i livelli di molecole infiammatorie GCF sinergicamente e in modo indipendente.. Il diabete di tipo 2 è stata associata ad alta Th-2 il rapporto /Th-1, e modulata l'espressione locale di molecole coinvolte nei processi anti-infiammatori e di guarigione.
Parole Diabete mellito parodontite cronica infiammazione gengivale crevicolare citochine fluido Sfondo diabete mellito rappresenta un gruppo eterogeneo di malattie metaboliche in cui elevati livelli di glucosio nel sangue portano a disturbi del metabolismo dei carboidrati, grassi e proteine [1]. La forma più comune è il diabete di tipo 2 [2]. Il diabete è una delle principali preoccupazioni di salute pubblica con 380 milioni di persone che soffrono di questa malattia in tutto il mondo, e circa l'80% dei pazienti provengono da paesi a basso e medio reddito [3]. Si prevede che l'Africa sarà prendere l'iniziativa in termini di maggiore incremento proporzionale negli adulti con diabete entro il 2030 [4]. La prevalenza del diabete in Sudan, come in molti altri paesi a basso reddito, è in aumento di proporzioni epidemiche [5]. Nel 2014, la prevalenza della malattia in Sudan era di circa il 18% [3], che si colloca il Sudan tra i paesi con alta prevalenza di diabete in Africa e nel mondo. Essa riflette inoltre il cambiamento di stile di vita e il movimento di urbanizzazione della popolazione.
Iperglicemia cronica è associato a complicanze irreversibili come la nefropatia, la retinopatia, neuropatia, malattie cardiovascolari, malattie vascolari periferiche, ritardata guarigione e malattie parodontali [6]. malattie parodontali, compresa la forma reversibile (gengiviti), sono molto diffuse e interessano fino al 90% degli adulti in tutto il mondo [7]. parodontite cronica è caratterizzata dalla migrazione apicale dell'attacco epiteliale accompagnato da perdita di tessuto connettivo e dell'osso alveolare [8]. Questi cambiamenti sono mediate dall'interazione tra agenti patogeni e la risposta immunitaria-infiammatoria host [9]. Sebbene patogeni parodontali sono considerati come fattore iniziativa della malattia, [10] distruzione tissutale in periodontite cronica è la conseguenza della risposta dell'ospite ai patogeni [11].
Il meccanismo esatto mediante il quale il diabete colpisce i tessuti parodontali non è pienamente chiarito [12]. Una risposta immunitaria-infiammatoria alterata agli agenti patogeni batterici è stato suggerito [11]. L'iperglicemia può influenzare i tessuti parodontali, aumentando lo stress ossidativo a causa dello squilibrio tra le specie reattive dell'ossigeno e antiossidanti, che possono portare a un accumulo di Advanced glicazione finali prodotti (AGE) [13]. Il legame di AGE ai loro recettori (RAGE) attiva gli eventi intra-cellulari che aumentano la produzione di citochine pro-infiammatorie, chemochine e molecole di adesione cellulare [14]. L'iperglicemia può essere valutata misurando la concentrazione di emoglobina glicata (HbA1c), che riflette i livelli di glucosio medi nei precedenti 8-12 settimane [15].
Un mezzo per indagare la condizione infiammatoria locale del cavo orale è di analisi fluido crevicolare (GCF), un metodo non invasivo per valutare la presenza o assenza di varie molecole infiammatorie [16]. GCF è un trasudato o essudato infiammatorio che possono essere raccolti dal gengivale che circonda i denti. Esso contiene componenti di sangue circolante, tessuti locali e, soprattutto, molecole infiammatorie ospite-derivati [16, 17].
Maggior parte degli studi di GCF molecole infiammatorie in individui con diabete sono stati generalmente basati su piccoli campioni di soggetti e di indagine un numero limitato di molecole infiammatorie, con risultati inconcludenti [12]. analisi Multiplex di molecole infiammatorie, per cui un gran numero di molecole infiammatorie può essere indagato, allo stesso tempo, faciliterebbe la comprensione del processo infiammatorio coinvolto nel diabete e malattie parodontali.
Lo scopo di questo studio era di valutare l'effetto di diabete di tipo 2 l'espressione locale di molecole infiammatorie coinvolte nella infiammazione parodontale e la guarigione, confrontando i livelli GCF di 27 molecole infiammatorie nei pazienti con diabete di tipo 2, con e senza parodontite cronica, e nei soggetti parodontite cronica senza diabete. Una correlazione tra il putativo HbA1c e le molecole oggetto di indagine è stato anche esplorato. Abbiamo testato l'ipotesi che il diabete di tipo 2 influenza negativamente l'espressione locale delle molecole infiammatorie sotto inchiesta
. Metodi
Disegno dello studio e partecipanti
In tutto, 108 individui sono stati arruolati nello studio, che rappresenta un sottoinsieme scelto a caso da 461 partecipanti reclutati per uno studio precedente di Mohamed et al. [18]. I soggetti sono stati stratificati in tre gruppi: 54 con diabete di tipo 2 e parodontite cronica (DM + CP), 30 con parodontite cronica (CP) e 24 con diabete di tipo 2 (DM). I partecipanti allo studio erano di età compresa 24-70 anni. I pazienti diabetici sono stati reclutati da The Jaber Abol'ez Diabetes Center a Khartoum-Sudan. Il diabete è stato diagnosticato da un medico specialista presso il centro secondo i criteri della American Diabetes Association [19]. campioni di sangue intero ottenuti da pazienti con diabete sono stati analizzati per HbA1c da boronato cromatografia di affinità utilizzando un kit disponibile in commercio (LabonaCheck
™ analizzatore A1c) [20]. Il gruppo CP è stato reclutato dalla clinica odontoiatrica ambulatoriale al Khartoum Dental Teaching Hospital. Reclutamento dei partecipanti allo studio e criteri di ammissibilità per l'iscrizione sono stati descritti in precedenza [18]. In sintesi, i criteri per l'iscrizione erano (i), la diagnosi di diabete di tipo 2 per più di un anno e che frequentano una clinica specializzata diabete -Per pazienti con per il diabete di (ii), con almeno 10 denti rimanenti (iii), nessun antibiotico, nessun farmaco anti-infiammatori non steroidei e /o non-steroidei utilizzati durante le ultime 3 settimane (IV), non trattata con la chemioterapia immunosoppressiva, senza malattia acuta attuale, nessun trattamento parodontale professionale ricevuto nel corso degli ultimi 6 mesi e nessuna gravidanza o allattamento in corso. I dati demografici sono stati ottenuti dai partecipanti allo studio per mezzo di un questionario strutturato.
Il protocollo di studio è stato approvato dal Ministero della Salute in Sudan e al comitato etico norvegese di ricerca presso l'Università di Bergen (2012/1470 /REK Vest) . I partecipanti allo studio sono stati arruolati tra luglio e dicembre 2012. consenso informato scritto è stato ottenuto da ciascun partecipante, dopo gli obiettivi del progetto, sono stati spiegati i passaggi della esame clinico orale e le procedure di campionamento. I partecipanti sono stati informati della loro diagnosi dentale e di cui per il trattamento odontoiatrico adeguato se indicato.
Esame parodontale clinico
Tutte le valutazioni cliniche, allocazioni di gruppo e di selezione di campionamento in loco sono state effettuate da un singolo, esaminatore calibrato (HGM). L'esame parodontale ha incluso tutti i denti, eccetto i 3 molari RD utilizzando un codice colore sonda parodontale (N22, 2-4-6-8-10-12 mm marcature), una sonda biforcazione Nabors codice colore (NAB2, 3 -6-9-12 mm marcature), curette specchio, sonda, pinzette e rulli di cotone. L'esame clinico comprende la valutazione della placca dentale utilizzando il Silness e Loe Index [21], sanguinamento al sondaggio (BOP), ha segnato come presente o assente, e la profondità di sondaggio (misurata dal margine gengivale alla base della tasca parodontale in millimetri) a quattro siti su ogni dente (mesiale, distale, buccale e linguale). I partecipanti sono stati diagnosticati come avendo parodontite cronica se avessero almeno due siti con sanguinamento sacche di ≥ 4 mm (non sullo stesso dente) [22, 23]. L'esame orale è stato ripetuto per 20 partecipanti selezionati in modo casuale entro 2 settimane. affidabilità intra-esaminatore è stata valutata mediante il coefficiente kappa di Cohen [24]. valore di tipo kappa (κ) è stato 0.88 per la parodontite cronica (sì /no)
. GCF campionamento
campioni GCF sono stati raccolti utilizzando le strisce perio-carta, (PERIOPAPER® gengivali bande di captazione di fluidi, Oraflow Inc., New York, Stati Uniti d'America ). Quattro campioni, ciascuno dei quali rappresenta un quadrante, sono stati raccolti da ciascun partecipante. La striscia è stato inserito nel sito mesiobuccal del solco /tasca del 1 st molare. Se manca, il 2 nd molare, 2 nd premolari o 1 st premolare è stato campionato, rispettivamente. Quadranti senza denti posteriori sono stati esclusi dal campionamento. Dopo il biofilm sopragengivale era stato rimosso con pellet di cotone sterile, i siti sono stati asciugati e isolati con rulli di cotone. Le strisce di carta sono stati inseriti 2 mm nel solco /tasca e lasciati sul posto per 30 s. Le strisce che sono stati valutati visivamente come contaminati con sangue o saliva sono state scartate. Le strisce 4 sono stati immediatamente raggruppati in un tubo, etichettati e conservati in azoto liquido per ulteriori analisi. Estrazione
proteine e quantificazione
Per l'estrazione delle proteine, tampone Tween (230 ml) è stato aggiunto a ciascuna delle provette contenenti il 4 strisce. Le provette sono state agitate per 30 min e poi centrifugati per 10 min a 4 ° C e 1400 giri. La proteina estratta è stata quantificata utilizzando un kit disponibile in commercio e seguendo le istruzioni del produttore (Pierce ™ Kit BCA Protein Assay, Thermo Scientific, Rockford, Stati Uniti d'America). Assorbanza è stata misurata a 560 nm su un lettore di piastre (FLUOstar OPTIMA- BMG Labtech, Germania). proteine totali per campione (4 strisce) è stato calcolato in microgrammi (mcg).
Analisi e raggruppamento di molecole infiammatorie
Dopo l'estrazione di proteine, i campioni GCF (20 ml ciascuno) sono stati elaborati da immuno-multiplex contenente microsfere fluorescenti tinti coniugati con anticorpo monoclonale specifico per 27 molecole infiammatorie (Bio-Plex umana citochine Assay; Bio-Rad Inc., Hercules, CA, USA) [25]. sono state analizzate le seguenti molecole: IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, eotaxina, fattore di crescita dei fibroblasti di base
(FGF), fattore stimolante le colonie dei granulociti
(G-CSF), granulociti-monociti fattore stimolante le colonie
(GM CSF), interferone-γ
(INF-γ), interferone inducibile Protein-10
(IP-10), monociti Chemo-attraente Protein-1
(MCP-1), macrofagi infiammatori proteina-1α
(MIP-1α), macrofagi infiammatori proteina-1β
(MIP-1β), Platelet-Derived Growth Factor
(PDGF), regolamentato dopo l'attivazione, normalmente T-espresso, e
Presumibilmente Secreted (RANTES), Tumor Necrosis Factor-α
(TNF-α) e Vascular Endothelial Growth Factor
(VEGF). I campioni sono stati diluiti 1: 4 (50 ml in totale) e incubate con perline accoppiate. Complessi sono stati lavati, incubati con anticorpo di rilevazione e, successivamente, con streptavidina-ficoeritrina. Una gamma di 105.876-0,29 pg /mL citochine ricombinanti è stato utilizzato per stabilire le curve standard. I livelli delle molecole infiammatorie sono stati misurati su un lettore di serie multiplex (Bio-Plex Workstation da Bio-Rad Laboratories). . Le quantità finali sono stati calcolati utilizzando il software fornito dal produttore e sono stati riportati come picogrammi per 30 s (pg /30 s) [26] commercio basato sugli effetti biologici di ogni molecola, le molecole oggetto di indagine sono stati raggruppati come: pro citochine -inflammatory (IL-1b, IL-6, IL-9, IL-12 e TNF-alfa), citochine anti-infiammatorie (IL-4 e IL-10), chemochine (IL-8, IP-10, MCP -1, MIP-1α, MIP-1β e RANTES) e T-helper 2 /T-helper 1 ratio (Th-2 /Th-1) (IL-4, IL-6, IL-9, IL-10 /INF-γ, IL-2). L'analisi statistica
differenze inter-gruppo in dati demografici e clinici sono stati valutati usando chi quadrato e il test esatto di Fisher per le variabili categoriche, una analisi della varianza (ANOVA) con il post -hoc (Sidak) regolazione per confronti multipli per le variabili continue normalmente distribuite, e Kruskal-Wallis e Mann-Whitney test per dati sghembi. Poiché la distribuzione dei livelli delle molecole studiate è inclinato, i collegamenti logaritmo naturale sono stati calcolati e utilizzati per rilevare le differenze tra i gruppi di studio e analisi della varianza ad una via (ANOVA) con post-hoc (Sidak) è stato condotto. modelli lineari generalizzati (GLM) con la famiglia gaussiana e la funzione di log sono stati usati per registrare per ottenere l'effetto potenzialmente confondente di età, sesso, abitudine al fumo, la placca dentale, BOP e proteine totali sul risultato (quantità molecola). Una possibile correlazione tra HbA1c e lo stato infiammatorio è stata studiata usando la correlazione di Pearson. Stata 13 (StataCorp 2013. Stata Statistical Software:. Rilasciare 13. College Station, TX:. StataCorp LP) è stato utilizzato per l'analisi dei dati. valori di p inferiori a 0,05 sono stati
considerato statisticamente significativo. Risultati
Le caratteristiche demografiche e parametri clinici dei gruppi di studio sono presentati nella tabella 1. BdP è stato l'unico parametro clinico che differiva significativamente tra i due gruppi. E 'stata più alta nel gruppo DM + CP rispetto ai gruppi CP e DM. I seguenti molecole infiammatorie, che non sono stati individuati oltre il 30% dei campioni GCF, sono stati esclusi dall'analisi: (IL-1ra, IL-5, IL-13, IL-15 e eotaxina). I mezzi non aggiustati delle quantità di molecole rilevate attraverso i gruppi di studio sono presentati nella Tabella 2. Dopo aggiustamento per i potenziali confondenti (età, sesso, abitudine al fumo, bilancia dei pagamenti, indice di placca dentale e della proteina totale), il gruppo DM + CP aveva più alto livelli di iL-8 e MIP-1β, e bassi livelli di TNF-α, iL-4, INF-γ, RANTES e iL-7 rispetto al gruppo CP. Inoltre, il gruppo DM + CP ha bassi livelli di IL-6, IL-7 e G-CSF rispetto al gruppo DM. Il gruppo DM aveva livelli elevati di IL-10, VEGF, e G-CSF rispetto al gruppo CP. Entrambi i gruppi diabete (DM + CP e DM) avevano livelli più bassi di MIP-1α e FGF rispetto ai soggetti senza diabete parodontite cronica (CP) (Tabella 3) .table 1 Distribuzione di indicatori socio-demografiche e cliniche da parte di gruppi di studio
variabile
DM + CP (n = 54
)
CP (n = 30
)
DM (n
= 24)
Age, media (SE) 1
54.76 (1.37)
55.37 (1.83)
50.79 (2.05)
genere,% (n) 2
Maschio
42.59 (23)
60.00 (18)
29.17 (7)
femminile
57.41 (31)
40.00 (12)
70.83 (17)
Istruzione,% (n) 2
Illiterate
29.63 (16)
33,33 (10)
20.83 (5)
Literate
70.37 (38)
66.67 (20)
79.17 (19)
occupazione,% (n) 2
Disoccupati
62.96 (34)
43.33 (13)
70.83 (17)
Impiegato
37.04 (20)
56.67 (17)
29.17 (7)
fumare,% (n) 3
Sì
12.96 (7)
26.67 (8)
12,50 (3)
No
87.04 (47)
73,33 (22)
87.50 (21)
Ipertensione,% (n) 2
Sì
31.48 (17)
20.00 (6)
29.17 (7)
No
68.52 (37)
80.00 (24)
70.83 (17)
presenza dentale regolare,% (n) 3
Si
3.70 (2)
10,00 (3)
8.33 (2)
No
96.30 (52)
90.00 (27)
91.67 (22)
durata del diabete, significa (SE) 4
8.44 (0.83)
-----
9.67 (1,70)
HbA1c%, media (SE) 5
9.17 ( 0,24)
-----
9.25 (0.49)
indice di placca, media (SE) 1
1,66 (0,05)
1,40 (0,06)
1,47 (0,07)
Percentuale di denti con BdP, media (SE) 1
58.88 (2.85) un
28.97 (3.82) b **
32.51 (4.28) b **
Pocket profondità,% (n) 2
4-5 mm
59,30 (32)
70.00 (21)
0.00 (0)
≥6 mm
40.70 (22)
30.00 (9)
0.00 (0)
profondità tasca, dire (SE) 4
4,16 (0,09)
4,25 (0,12)
-----
proteine totali -μg, dire (SE) 6
82.78 (7.53)
84.23 (15.25)
77.84 (9.06)
diverse lettere indicano differenze statisticamente significative
1One ANOVA
test 2chi-piazza
test esatto di 3Fisher
4Mann-Whitney U
test
5Independent T prova
campione
test 6Kruskal-Wallis
** P
& lt; 0.01
Tabella 2 livelli di molecole infiammatorie rilevati tra i gruppi di studio (pg /30s)
molecola infiammatoria, media (SE)
DM + CP (n
= 54)
CP (n = 30
)
DM (n = 24
)
IL-1β
350.50 (31.18)
260,31 (41.45)
261,74 (46.34)
IL-6
9.01 (0.83) un
11.12 (1.11) ab
12.67 (1.27) b *
IL-9
6.91 (0.57)
9,64 (0,76)
8.57 (0.87)
IL-12
13.93 (1.07)
16.44 (1.43)
17.13 (1.63)
TNF-α
17.70 (1.84) un
31.57 (2.47) b **
22.05 (2.82) ab
IL-4
0,83 (0,06) un
1,26 (0,09) b **
0.92 (0.10) ab
IL-10
27.74 (1.43) ab
23.68 (1.90) un
33.02 (2.17) b **
IL-2
8,01 (0,98) a *
8.93 (1.30) a *
12.68 (1.48) b
INF-γ
29.55 (2.61) un **
47,50 (3,50) b
33.89 (3.92) a *
IL-8
633,87 (48.22)
501,96 (62.25)
507,65 (69,60)
IP-10
19.32 (2.30) un
24.60 (3.01) ab
29.13 (3.43) b *
MCP-1
6.10 (0.87) un
10.73 (1.11) b **
7.88 (1.24) ab
MIP-1α
3,14 (0,27) a *
4.52 (0.36) b
2.98 (0.40) a *
MIP-1β
23.53 (2.64)
21.37 (3.54)
26.03 (3.95)
RANTES
32.93 (2.77)
45.64 (3.72)
40.12 (4.16)
FGF
76.91 (4.62) un **
105.16 (6,20) b
76.34 (6.93) a *
PDGF
13.05 (0.93) un
17.22 (1.24) b *
15.45 (1.39) ab
VEGF
212,01 (11,75)
188.50 (15.77)
222.83 (17.63)
IL-7
2.63 ( 0.31) un
4,85 (0,42) b **
4.24 (0.47) b **
G-CSF
122.73 (12.48 ) un
131.02 (16.75) ab
196,73 (19.13) b **
GM-CSF
621,28 (21.82)
558,27 (29.28)
555,30 (33,44)
IL-17
72.04 (3.71) un
246,03 (62.90 ) b **
79.98 (6.68) ab
diverse lettere indicano differenze statisticamente significative utilizzando ANOVA per logaritmo naturale. link delle quantità di molecole infiammatorie
* P
& lt; 0.05
** P
& lt; 0.01
Tabella 3 medie aggiustate dei livelli di molecole infiammatorie (pg /30s)
molecola infiammatoria, media (SE)
DM + CP (n = 54
)
CP (n = 30
)
DM (n = 24
)
IL-6
9.01 (0.94) un
11.11 (1.30) ab
14.01 (1,50) b *
TNF-α
17.68 (2.06) un
31.64 (3.16) b **
23.13 (3.20) ab
IL-4
0,84 (0,07) un
1.25 ( 0,11) b *
0,96 (0,11) ab
IL-10
28.82 (1,66) ab
22.46 (1.99) un
33.72 (2.42) b **
INF-γ
30.62 (2.99) un
45.77 (4.29) b *
36.88 (4.62) ab
IL-8
699,48 (53.44) un
464,17 (57,03) b *
503,04 (71.04) ab
MIP-1α
3,05 (0,32) a *
4,79 (0,47) b
2.99 (0.45) una *
MIP-1β
28.71 (3.05)
a 16.84 (2.86) b *
22.37 (3.40) ab
RANTES
31.94 (3.14) un
48.01 (4,70) b *
41.16 (4.79) ab
FGF
71.66 (5.17) un **
113.28 (7,90) b
80.86 (7.93) un **
VEGF
215,04 (12,69) ab
177.52 (16.40) un
255,82 (19,39) b **
IL-7
2.81 (0.35) un
4.47 (0,51) b *
4,78 (0,56) b *
G-CSF
131.71 ( 14.41) a *
116.98 (17.79) un **
206.60 (21.25) b
diverse lettere indicano differenze statisticamente significative utilizzando GLM con la famiglia gaussiana e log . funzione di aggiustamento per età, sesso, abitudine al fumo, BdP, indice di placca dentale e proteine totali
* P
& lt; 0.05
** P
& lt; 0.01
Il rapporto Th-2 /Th-1 era significativamente più alta nei gruppi di diabete (DM + CP e DM) rispetto al gruppo CP (Fig. 1D). È stata osservata una debole correlazione positiva tra HbA1c ed i livelli di citochine pro-infiammatorie (Pearson coefficiente di correlazione: 0,27, valore di P: 0,02) (Fig. 2), mentre la correlazione tra HbA1c e le citochine antinfiammatorie non era statisticamente significativa (coefficiente di correlazione di Pearson: -0.11, valore di P: 0,33) (Fig. 3). Figura. 1 I livelli di molecole infiammatorie nel GCF dei gruppi di studio. un: citochine pro-infiammatorie (IL-1β, IL-6, IL-9, IL-12, TNF-α), b: citochine anti-infiammatorie (IL-4, IL-10), C: chemochine (IL- 8, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, RANTES), d: Th-2 /Th-1 ratio: (IL-4, IL-6, IL-9, IL-10) /(INF-γ, IL-2), **: P
& lt; 0,01
Fig. 2 Correlazione tra HbA1c e le citochine pro-infiammatorie. Pearson coefficiente di correlazione: 0,27, valore di P: 0.02
Fig. 3 Correlazione tra HbA1c e le citochine anti-infiammatorie. Pearson coefficiente di correlazione: -0.11, P valore: 0,33
Discussione
citochine pro-infiammatorie inducono risposta infiammatoria a vari stimoli, come lipopolisaccaridi batterici [27]. In pazienti con diabete, IL-1β è considerato una delle citochine chiave distruzione tissutale parodontale infiammatorio [28]. Nel presente studio, il livello di IL-1β era più alta nel gruppo CP DM +, anche se non statisticamente significativa. Una recente meta-analisi ha riportato che i pazienti affetti da diabete di tipo 2 con parodontite cronica sono stati trovati ad avere significativamente più elevati livelli GCF di IL-1β rispetto ai loro omologhi a livello sistemico sani [29]. Al contrario, gli altri non sono riusciti a confermare una associazione tra i livelli di IL-1β e diabete in soggetti con malattia parodontale [30, 31]. Queste incoerenze potrebbero essere attribuiti alla differenza nei livelli di HbA1c e la durata del diabete. risultati contraddittori sono stati riportati dagli studi dei livelli di TNF-alfa nei fluidi orali tra i pazienti con diabete e parodontite cronica [12]. Nel presente studio, i livelli sia di TNF-α e IL-7 erano inferiori nel gruppo DM + CP rispetto al gruppo CP. Al contrario, altri studi hanno riportato elevati livelli di TNF GCF-α e IL-7 in pazienti con diabete di tipo 2 rispetto a individui sani sistemico [29, 32]. In questo contesto, è interessante notare che i livelli di citochine e chemochine pro-infiammatorie nel gruppo DM erano confrontabili con quelli del gruppo CP, che riflette un processo infiammatorio locale attivo nel gruppo DM (Fig. 1a-1c) . È stata osservata una correlazione positiva tra la debole HbA1c ed i livelli di citochine pro-infiammatorie. Un altro studio ha riportato una correlazione positiva tra livelli IL-1β in GCF e HbA1c [33].
Studiando l'effetto di IL-6 e IL-10, in particolare in studi trasversali, è complicata dal fatto che entrambi siano citochine multifunzionali (cioè pro e anti-infiammatori) [34, 35]. IL-6 è coinvolta nella attivazione degli osteoclasti e di Th-17 cellule [36]. Al contrario, induce anche la produzione di IL-1ra, pertanto contribuisce al processo antinfiammatorio [37]. Non ci sono prove a sostegno di una associazione tra aumento dei livelli di IL-6 e malattia parodontale distruttiva tra gli individui con iperglicemia [38]. Tuttavia, Javed et al., [39] ha riferito che up-regolazione di IL-6 insieme con IL-1α potrebbe essere associato con la distruzione dei tessuti parodontali correlate diabete. Nel presente studio, i livelli della citochina antinfiammatoria IL-4 erano inferiori nel gruppo DM + CP rispetto al gruppo CP. E 'stato riportato che IL-4 è down-regolata in pazienti con diabete di tipo 2 [40]. Inoltre, in un in vivo modello animale per legamento guarigione, è stato trovato IL-4 per contribuire alla fase proliferativa della guarigione [41]
. Chemochine sono piccoli peptidi che reclutano cellule immunitarie dalla circolazione ai tessuti come necessario [42]. La maggior parte delle indagini del ruolo delle chemochine sono concentrati su IL-8 [12]. Nel presente studio, IL-8 è up-regolato nel gruppo DM + CP rispetto al gruppo CP. La stessa tendenza è stata osservata in una indagine dei livelli sierici di IL-8 [43]. MIP-1α è una chemochina potente che attrae i macrofagi, T-citotossici e le cellule natural killer [44]. E 'stato down-regolato in entrambi i gruppi di diabete (DM + CP e DM) rispetto al gruppo CP. Al contrario, Duarte et al., [32] ha riportato livelli più elevati di MIP-1α in pazienti con diabete di tipo 2 scarsamente controllato rispetto ai controlli sani sistemica. Il presente studio ha dimostrato bassi livelli di RANTES nel gruppo DM + CP rispetto al gruppo CP. E 'stato riferito che i livelli di RANTES correlano negativamente con maggiore infiammazione [45]. Diabete di tipo 2
potrebbero influire negativamente sulla salute parodontale da molecole down-regolazione coinvolti nella rigenerazione dei tessuti parodontali e il processo di guarigione, come FGF e PDGF [46, 47] . FGF è stato rilevato in quantità inferiori nei gruppi diabete (DM + CP e DM) rispetto al gruppo CP. Inoltre, i livelli di VEGF erano più alti nel gruppo DM rispetto al gruppo CP. Questa osservazione può essere spiegata dal fatto che lo stress ossidativo induce la segnalazione VEGF in pazienti con diabete di tipo 2 [48]. Inoltre, i nostri risultati confermano VEGF con uno studio precedente, che ha registrato un trend non significativo verso una maggiore VEGF nel GCF dei pazienti con diabete di tipo 2 e parodontite cronica rispetto a individui sani sistemica con parodontite cronica [49]. Al contrario, Guneri et al., [50] ha concluso che i livelli di VEGF GCF sono stati elevati nei soggetti con parodontite cronica indipendentemente dal loro stato diabetico.
Secondo le citochine che producono, Th-cellule si dividono in Th-1, th-2, th-17 e le cellule T-normativi. Th-1 secerne IL-2 e IFN-γ, mentre Th-2 secerne IL-4, IL-6, IL-9, IL-10 e IL-13 [51, 52]. Solo Sono disponibili informazioni limitate sul ruolo del Th-cellule in pazienti con diabete di tipo 2 con parodontite [12]. Th-2 /Th-1 ratio è stato superiore in entrambi i gruppi di diabete (DM + CP e DM) rispetto al gruppo CP, indicando migliorata risposta umorale e la progressione della malattia parodontale nei pazienti con diabete di tipo 2 attraverso Th-2 /B-cell asse [53, 54].
nel presente studio, i bassi livelli di alcune delle molecole pro-infiammatorie identificati in diabetici di tipo 2 comparati a quelli senza diabete può essere spiegato dal fatto che alcuni dei pazienti con diabete sono stati sottoposti a terapia insulinica, che potrebbe influenzare l'espressione locale di molecole infiammatorie [43, 55]. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.
