-. Per 1,00 g dentifricio come la quantità comune per applicazione
Si è quindi lo scopo di questo studio per valutare l'efficienza relativa dei due trattamenti al fluoro sulla demineralizzazione e rimineralizzazione dello smalto dentale umano in un modello di pH ciclismo. Qualitativa e semi-quantitativa microscopia ottica polarizzata di sezioni seriali di terra è stato utilizzato per rilevare la morfologia delle lesioni e per valutare il volume dei pori di de- e rimineralizzazione. Polarizzata microscopia ottica è stata scelta come metodo per determinare la morfologia delle diverse lesioni perché permette di distinzione tra le diverse zone di lesione. Anche l'estensione delle diverse zone lesioni potrebbe essere misurata esattamente.
Metodi
tessuto
Venti tre completamente influenzato terzi molari umani sono stati utilizzati in accordo con le istruzioni di BPL che disciplinano l'uso di tessuti umani. Questi denti sono stati selezionati per la struttura dello smalto uniforme senza sfide individuali a causa della non esposizione alla cavità orale. Subito dopo la rimozione chirurgica clinicamente indicato che sono stati accuratamente puliti di detriti organici e conservati in soluzione fisiologica contenente 0,1% di timolo. Nessun ulteriore trattamento di superficie dello smalto è stato applicato. I denti erano di rivestito con cera lasciando una finestra di 3 × 4 mm sul lato buccale e superfici lisce linguali e, infine, assegnati in modo casuale a 4 gruppi (Tab. 1) .table 1 Nel complesso sperimentale di progettazione
Group
Demineralisation
Remineralization
Teeth
Lesions
N
(controllo negativo)
standardizzata
HEC-gel
pH 4.7, 37 ° C
Saline
37 ° C
5
10
P
(controllo positivo)
Remin. soluzione
pH 7,0, 37 ° C
6
12
D1
(sperimentale)
|
Remin. soluzione + Denttabs® 1450 ppm
F- pH 7,0, 37 ° C
6
12
D2
(sperimentale)
|
Remin. soluzione + Denttabs® 4350 ppm
F- pH 7,0, 37 ° C
6
12
demineralizzazione /Rimineralizzazione, pH-Cycling
condizioni di pH di ciclismo sono stati scelti per creare avanzati lesioni dello smalto artificiale su superfici lisce naturali. Ogni ciclo è stato programmato per 3 giorni ed è stato ripetuto per 6 volte. Il periodo sperimentale di pH-ciclismo è durata quindi 18 giorni. Dopo demineralizzazione e rimineralizzazione (tranne per il gruppo di controllo negativo) i campioni sono stati sciacquati in acqua distillata per rimuovere la soluzione di gel di trattamento in eccesso. gel demineralizzazione conteneva 1,5 mm CaCl 2, 0,9 mm KH 2PO 4, 150 mM KCl, 0,1 M tampone acetato di sodio, 30 mM di acetato di cellulosa hydroxyehtyl. Il pH è stato regolato a 4,7 e controllato prima e dopo ogni ciclo di 3 giorni [6].
Soluzioni remineralizzazione erano costituite 1.5 mM CaCl 2, 0.9 mM KH 2PO 4, e 150 mM KCl a pH 7,0, ancora controllato prima e dopo ogni ciclo di 3 giorni.
la cera denti rivestiti sono stati fissati con fili metallici e appendere nelle rispettive soluzioni (figura 1) e il volume di ciascuna soluzione era di 100 ml. Queste soluzioni sono state costantemente agitati con un agitatore magnetico. Tutti i cicli sono stati eseguiti in condizioni climatiche costanti a 37 °. Le superfici vetrate sono stati controllati prima microphotographically pH-ciclismo scartare campioni con smalto crack di graffi iatrogene e per documentare le lesioni macchia bianca artificiale dopo 18 giorni. Figura 1 Impostazione della procedura di incubazione. I denti di cera rivestito sono state fissate per fili metallici e sono stati appesi nella diversi mezzi di incubazione. I media di incubazione erano costantemente lentamente agitati con un agitatore magnetico.
Gruppi di trattamento
Il programma sperimentale è presentato nella tabella 1. Il gruppo di controllo negativo N di 5 denti con10 lesioni solo Subì cicli di demineralizzazione ed è stato mantenuto durante i cicli di remineralizzazione in soluzione salina. Il gruppo di controllo positivo P di 6 denti con 12 lesioni è stata rimineralizzata nella soluzione specificata senza contenuto di fluoro. I 2 gruppi sperimentali (D1 e D2) di 6 denti con 12 lesioni ciascuno sono stati esposti a soluzione rimineralizzazione contenente Denttabs ® con 1450 ppm F - (D1) o Denttabs ® con 4350 ppm F - (D2). Le compresse igiene orale contengono fluoruro da NaF, e gli altri ingredienti secondo INCI sono microcristallina idrossietilcellulosa, silice idrata, carbonato acido di sodio, laurilsolfato di sodio, acido ascorbico, stearato di magnesio, aspartame e sapore di menta.
Le compresse sono state sospese in la soluzione rimineralizzazione con un rapporto di una compressa al 5 ml di soluzione per simulare la biodisponibilità massima di fluoruro subito dopo la spazzolatura (Naumova et al., fluoruro biodisponibilità nella saliva dopo aver usato DENTTABS ® rispetto al dentifricio, presentata).
microscopia a luce polarizzata (PLM)
Dopo la rimozione dei rivestimenti di cera standardizzati micro foto di tutte le lesioni a 10 × ingrandimenti sono state prese. Prima di ulteriori trasformazioni sono state rimosse le radici. Tutti i denti sono stati poi disidratati in alcool assortite e incorporati in Technovit 9100 (Kulzer, Weinheim, Germania). Sezioni seriali di terra sono stati tagliati con un microtomo sega (LEICA CM 1900, Leica, Wetzlar, Germania) con uno spessore di 80 micron in direzione corono-apicale. Tre sezioni di terra per dente rappresentano due approssimale ed una zona mediana delle lesioni sono stati usati per la valutazione quantitativa e qualitativa semi della morfologia della lesione.
La valutazione qualitativa delle caratteristiche di zona lesione incluso l'omogeneità della zona superficiale e del corpo di la lesione rappresenta la perdita di minerali specifica area a causa del cambio birifrangenza di diversi volumi dei pori imbibited con Technovit 9100. Inoltre è stata analizzata la presenza di lamierini nel corpo della lesione e la zona traslucida rilevabile.
per l'analisi quantitativa della misura delle rispettive zone di lesione carie-like (zona superficiale, il corpo della lesione, zona traslucido) è stata misurata in micron integrando loro valori massimi e minimi e continuando a distanze uguali su tutta la lesione fino a 10 misurazioni sono state valutate. Tre sezioni di ogni lesione sono stati selezionati per le misure
. Statistiche
Poiché i dati non hanno mostrato alcuna distribuzione normale analisi statistica è stata effettuata utilizzando il test non parametrico di Mann-Whitney U e SPSS 14 come programma per computer. La significatività è stata determinata a p & lt; 0.05.
Risultati
macroscopica aspetto
in tutti e 4 i gruppi dopo 18 giorni sperimentali sono stati rilevati carie-come artificiali lesioni dello smalto di diversa intensità. Nessuna di queste lesioni esposte erosione superficiale e la morfologia superficiale a 10 × ingrandimenti era simile al suono smalto intorno alle lesioni. Tuttavia, vi era una marcata differenza della comparsa di lesioni white loco sottosuolo. Il gruppo di controllo negativo N ha mostrato lesioni bianco-punto avanzati piuttosto omogenei, mentre nel gruppo di controllo positivo P le lesioni piatte bianche erano meno omogenea con cambiamenti di colore. In contrasto con entrambi i gruppi sperimentali D1 e D2 portato a meno lesioni bianco-punto ad alta intensità, e il meno demineralizzazione sottosuolo vicino al macchie bianche non rilevabili è stata documentata per la D2 (Figura 2). Figura 2 Aspetto delle lesioni sperimentali. lesioni Bianco-punto nel gruppo di controllo N (a), gruppo rimineralizzazione P (B), gruppo sperimentale D1 con Denttabs® 1450 ppm di fluoro (c) e il gruppo sperimentale D2 con Denttabs® 4350 ppm di fluoro (d)
. qualitativa valutazione PLM
le caratteristiche 3 sezioni di terra per lesione sono riassunti nella Tabella 2. la zona di superficie e il corpo della lesione in sperimentali gruppi D1 e D2 sono meno omogeneo a causa del volume dei pori inferiore. Lamierini all'interno del corpo delle lesioni sono state rilevate prevalentemente in gruppi sperimentali D1 e D2. gruppo D2 mostrato rimineralizzazione parziale o totale compreso laminazione e /o scomparsa del corpo della lesione (Figura 3) .table 2 qualitativa polarizzata microscopia ottica con caratteristiche di lesioni dello smalto artificiali, percentuale di sezioni seriali terra
< col>
Gruppo
zona superficie omogenea
corpo della omogeneo
lesione
presenza di lamierini
rilevamento di traslucido zona
N
100%
90,0% sull'oggetto -
85,0%
P
100%
87,5%
8,3%
95,8%
D1
83,3%
75,0%
37,0%
100%
D2
70,8%
62,5%
45,8%
100%
Figura 3 luce microscopio polarizzate di esempi morfologiche dei 4 gruppi di controllo e di denti sperimentali. a) Controllo negativo N: zona superficiale omogenea, corpo demineralizzata della lesione senza lamierini; freccia con asterisco = zona superficiale, doppia freccia = corpo della lesione. b) Controllo positivo P: zona superficiale omogenea, più piccolo corpo della lesione, la zona traslucida rilevabile; freccia con asterisco = zona superficiale, doppia freccia = corpo della lesione. c) gruppo sperimentale D1: zona superficiale omogenea, piccolo gruppo del corpo della lesione, rilevabile freccia zona traslucido con zona asterisco = superficie doppia freccia = corpo della lesione. d) gruppo sperimentale D2: zona superficiale omogenea, corpo scomparsa della lesione con lamierini, ampia zona traslucida; linea tratteggiata con la freccia delineato = corpo lamellare della lesione, freccia = lamierini; doppie linee freccia = zona traslucida.
valutazione quantitativa PLM
I risultati delle misure dell'entità della zona superficiale, il corpo della lesione e della zona traslucida sono presentati nella Tabella 3. La zona superficie gruppo N è stata significativamente più esteso rispetto a tutti gli altri gruppi (p & lt; 0,01). Le differenze nella misura del corpo della lesione erano altamente significativi mostra la demineralizzazione almeno per il gruppo D2 con contenuto di fluoro (p & lt; 0,001). L'entità della perdita minerale per lesione e per ogni gruppo è stato N & gt; p & gt; D1 & gt; D2. La zona traslucida era più esteso nel gruppo D2 e statisticamente molto diverso da tutti gli altri gruppi (p & lt; 0,001). Ciò è stato confermato dal Kruskal - test di Wallis (p & lt; 0,001). I risultati erano gli stessi per la profondità totale di tutte le zone lesione nonché per la misura minima e massima. La perdita più minerale è stato osservato nel gruppo di controllo negativo N, e la minima perdita nel gruppo fluoro D2 (N & gt; p & gt; D1 & gt; D2) .table 3 estensione delle zone lesione micron nei vari gruppi
zona superficiale
corpo di lesione
traslucido zone
Group
Median
Mean
STD
Median
Mean
STD
Median
Mean
STD
N
14,2
15,7
5,5
203,5
203,3
40,7
67,8
78,9
30,9
P
10,7
10,9
2,9
135,7
132
20,3
89,2
87,6
18,6
D1
10,7
10,5
3
71,4
72
13,1
75
79,3
22,6
D2
10,7
11,2
5,5
35,7
37,2
13
100
99,4
36,7
Discussione
Precedenti studi di storia naturale di smalto umani lesioni cariose a denti decidui e permanenti utilizzando tre caratteristiche dimensionali di microscopia a luce polarizzata hanno contribuito alla comprensione delle dinamiche di carie progressione [7-9]. La stessa metodologia compreso il 3D-ricostruzione delle lesioni cariose-come artificiali e la valutazione del volume del corpo della lesione è stata sfruttata per testare vari dentifrici [1] e in diverse condizioni di pH [10]. Le dimensioni, il volume e la configurazione di queste lesioni artificiali sono molto diverse dalle caratteristiche tipiche di insorgenza precoce naturali, arrestati o lesioni progredendo. Tuttavia, le zone di lesione in luce polarizzata secondo Gustafson [11] sono le stesse, e create artificialmente carie come lesioni sono ampiamente utilizzati per rilevare la regolazione della deposizione minerale e dissoluzione [3] e per determinare l'efficienza relativa dentifrici fluoruro sotto condizioni di pH di ciclismo [2].
i dati di questo studio confermano gli effetti del fluoro sulla demineralizzazione e rimineralizzazione dello smalto umano. Si è constatato che il regime demineralizzazione oltre giorni 18. creati avanzata lesioni carie come con zone superficiali omogenee e volumi elevati pori del corpo della lesione. L'estensione è stata di circa 200 micron e diverso dai denti di controllo positivo di pH in bicicletta con una soluzione standard di remineralizzazione con una profondità di circa 120 micron.
La disponibilità di fluoruro dal 1450 ppm contenente compresse di igiene orale nella soluzione rimineralizzazione è stato pari a 96 ppm ( uno 0,33 g compressa al 5 ml di soluzione) ciò che corrisponde alla biodisponibilità fluoruro da un convenzionale 1400 ppm F - dentifricio nella saliva immediatamente dopo lo spazzolamento dei denti (Naumova et al, fluoruro biodisponibilità nella saliva dopo aver usato DENTTABS ® rispetto. a dentifricio, presentata). La disponibilità di fluoruro elevata dal 4350 ppm contenente compresse di igiene orale era 287 ppm quello che simula di nuovo la biodisponibilità nella saliva dopo dente spazzolatura con Denttabs ®.
In entrambi i gruppi sperimentali di denti della perdita minerale è diminuito enormemente e la diversa misura del corpo della lesione era altamente significativo. La profondità lesione del gruppo fluoro convenzionale D1 era circa 70 micron, e il corpo della lesione nel gruppo elevata fluoruro D2 era ancora più piccolo circa 40 micron. La zona traslucida non differiva in gruppi di controllo e nel gruppo di fluoruro convenzionale D1. Tuttavia, questa zona di demineralizzazione anteriore era significativamente più esteso nel gruppo fluoro elevata D2 rappresenta principalmente inibizione della demineralizzazione nella parte interna della lesione in contrasto con l'assorbimento di minerali nella parte esterna della lesione smalto umano. C'era anche un forte aumento di lamierini in quasi la metà di tutte le sezioni. Al contrario, laminazioni sono stati molto rari nel gruppo rimineralizzazione senza fluoro, ed erano del tutto assenti nei denti con solo cicli di demineralizzazione. Nelle lesioni bianco-punto naturale lamierini sono attribuiti a breve o lunga durata periodi di diversa carie sfida [12, 13]. Ten Cate et al. [2] hanno dimostrato che l'assorbimento di minerali e perdite si verificano in diverse profondità all'interno delle lesioni, e hanno supposto che ricristallizzazione fluoro-indotta ha cristalliti grande e meno solubile in acido. Le nostre caratteristiche PLM confermano questa ipotesi, e dimostrano una chiara relazione dose-risposta. La marcata differenza nella struttura minerale delle lesioni incipienti artificiali, rispetto allo smalto suono, dà luogo al fenomeno di remineralizzazione e demineralizzazione simultanea. Quantitative studi microradiographic dopo l'applicazione di una maggiore concentrazione di fluoruro mostrato un aumento remineralization nella lesione esterna e una diminuzione demineralizzazione nella parte interna, con un conseguente aumento significativo guadagno minerale [3]. Recentemente è stato discusso che con elevata F esterna - livelli, il F - gradiente potrebbe essere maggiore, guidando il fluoro profondo nella lesione avanzata, nonostante la F - diffusione essendo rallentato da adsorbimento su e reazione con cristalliti di idrossiapatite [4]. In base a questi risultati più alte concentrazioni di fluoro sono necessari per prevenire la progressione delle lesioni cariose-come artificiali. Pertanto, la F - biodisponibilità nei fluidi orali simulate dal disegno dello studio presentato svolge un ruolo significativo nel migliorare la rimineralizzazione dello smalto di carie lesioni
Conclusione
In conclusione, rimineralizzazione e demineralizzazione dello smalto avanzate umani carie-like. Le lesioni sono state trovate a beneficiare di più alte concentrazioni di fluoro (4350 ppm rispetto a 1.450 ppm) durante il trattamento di igiene orale in compresse in un modello di pH ciclismo
Dichiarazioni
Ringraziamenti
Gli autori ringraziano la signora Susanne Haussmann per la sua assistenza tecnica..
autori fascicoli presentati originali per
di seguito sono riportati i link ai degli autori fascicoli presentati originali per immagini. 'file originale per la figura 1 12903_2009_134_MOESM2_ESM.pdf Autori 12903_2009_134_MOESM1_ESM.pdf autori file originale per la figura 2 12903_2009_134_MOESM3_ESM.pdf Autori file originale per la figura 3 12903_2009_134_MOESM4_ESM.jpeg Autori file originale per il file originale figura 4 12903_2009_134_MOESM5_ESM.jpeg degli autori per la figura 5 file originale 12903_2009_134_MOESM6_ESM.jpeg degli autori per la figura 6 Conflitto di interessi
Gli autori dichiarano di non avere interessi in gioco. Prodentum, Berlino, Germania previsto il DETTABS® per questa indagine ma non ha avuto più influenza sul disegno dello studio.
Contributi degli autori pg è stato responsabile per la scrittura del manoscritto. TK effettuato gli esperimenti e le misurazioni. WHA è stato responsabile per gli studi morfologici.
Tutti gli autori hanno letto e approvato la versione definitiva del manoscritto.
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